VEGF和SDF-1在糖尿病大鼠視網(wǎng)膜上的表達(dá)及AMD3100對其的干預(yù).pdf

1、目的:研究基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在糖尿病視網(wǎng)膜病變中的表達(dá)情況，探討SDF-1拮抗劑對糖尿病大鼠視網(wǎng)膜新生血管的抑制作用。
　　 方法:選擇健康成年SD大鼠36只，隨機(jī)分成正常對照組、糖尿病組、拮抗劑組。制作SD大鼠糖尿病模型，以65mg/kg的劑量行左下腹腔注射10％鏈尿佐菌素溶液(STZ)，并于1周后檢測血糖，將餐后血糖濃度持續(xù)穩(wěn)定大于16.7mmol/L的大鼠定為糖尿病模型。拮抗劑

2、處理組為糖尿病大鼠玻璃體腔及球后注射AMD3100。各組按照標(biāo)本采取時間分為1月組、3月組、5月組。透射電鏡觀察各組大鼠視網(wǎng)膜微血管超微結(jié)構(gòu)的變化，免疫組織化學(xué)方法測定VEGF和SDF-1的表達(dá)，HE染色觀察各組大鼠視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)改變。所得數(shù)據(jù)用SPSS18.0軟件進(jìn)行分析。
　　 結(jié)果:
　　 1.血管透射電鏡觀察:(1)形態(tài)學(xué)差異:正常對照組未見異常改變，DM1開始出現(xiàn)異常改變，DM5最明顯，表現(xiàn)為內(nèi)皮細(xì)胞腫脹，向管腔

3、內(nèi)指狀突起，基底膜變性、增厚，異染色質(zhì)濃集居邊，周細(xì)胞數(shù)目減少，線粒體腫脹變性。各拮抗劑組雖然也出現(xiàn)上述改變，但與相應(yīng)時間點(diǎn)上的DM組相比明顯改善。(2)基底膜厚度改變:糖尿病組視網(wǎng)膜毛細(xì)血管平均基底膜厚度值與相應(yīng)時間點(diǎn)的正常組及拮抗劑組相比均增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;其中CON5大鼠視網(wǎng)膜毛細(xì)血管平均基底膜厚度為(0.043±0.082)μm，DM5為(0.257±0.203)μm，AMD5為(0.145±0.076)μm，DM5組平均

4、基底膜厚度值與CON5組平均基底膜厚度值相比升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，DM5組平均基底膜厚度與AMD5組平均基底膜厚度相比升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。且糖尿病組大鼠視網(wǎng)膜毛細(xì)血管基底膜厚度值隨著病程的延長逐漸增加，DM1、DM3、DM5三者比較均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.免疫組化:(1)形態(tài)學(xué)觀察:每組視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮均可見VEGF和SDF-1表達(dá)，主要位于內(nèi)層視網(wǎng)膜、內(nèi)顆粒層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層。VEGF和SDF-1在拮抗劑組視網(wǎng)膜上的表達(dá)

5、較對應(yīng)時間點(diǎn)糖尿病組視網(wǎng)膜上的表達(dá)弱，更接近于對應(yīng)時間點(diǎn)的正常對照組。(2)計算積累光密度(IOD):各組糖尿病組VEGF和SDF-1陽性表達(dá)的積累光密度的值與相應(yīng)時間點(diǎn)的拮抗劑組相比，相對升高，糖尿病組VEGF和SDF-1陽性表達(dá)的積累光密度的值與相應(yīng)時間點(diǎn)的正常組相比，相對升高，各組比較均有統(tǒng)計學(xué)意義。其中，5月組SDF-1陽性表達(dá)的積累光密度的值變化顯著，5月的正常對照組、糖尿病組、拮抗劑處理組的積累光密度值分別為(1.975±0

6、.312)、(4.376±0.283)、(3.105±0.337)，5月糖尿病組積累光密度值與5月拮抗劑組相比增加，比較有統(tǒng)計學(xué)意義，5月糖尿病組積累光密度值與5月正常對照組相比增加，比較有統(tǒng)計學(xué)意義。且隨著病程的延長糖尿病組中VEGF和SDF-1陽性表達(dá)的積累光密度值也增加，DM1、DM3、DM5三者比較均有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 3.HE染色顯示:(1)形態(tài)學(xué)觀察:拮抗劑組的石蠟切片HE染色表現(xiàn)與對應(yīng)時間點(diǎn)糖尿病組相比差異明顯，

7、更接近于正常對照組。(2)突破內(nèi)界膜的細(xì)胞核計數(shù):正常對照組極少見突出視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的內(nèi)皮細(xì)胞核，CON1、CON3、CON5組的突出視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的內(nèi)皮細(xì)胞核分別為(0.777±0.666)個、(1.222±1.092)個、(1.000±0.866)個，三組相比無統(tǒng)計學(xué)差異，而糖尿病組隨著病程的延長突出視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的數(shù)目也逐漸增多，DM1、DM3、DM5三者比較均有統(tǒng)計學(xué)意義。糖尿病組與相應(yīng)時間點(diǎn)的拮抗劑組相比，突破視網(wǎng)膜內(nèi)界膜的內(nèi)皮細(xì)胞