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文檔簡介
1、背景:Ⅰ型糖尿病的胰島移植治療一直面臨供體來源不足與免疫排斥兩大關(guān)鍵問題,尋找一種自體來源的種子細胞通過組織工程方法制備類胰島組織可以提供充足新型供體、降低異基因供體移植的副反應(yīng)。
目的:研究成人脂肪干細胞(Humanadipose-derivedstemcells,hASCs)體外分化為對葡萄糖敏感、可分泌胰島素的功能性胰島樣細胞團(Islet-likeclusters,ILCs)的能力,探索體外制備類胰島組織的技術(shù)路線,觀
2、察誘導(dǎo)后胰島樣細胞團對Ⅰ型糖尿病的治療效果。
方法:首先分離純化人體脂肪干細胞,利用流式細胞分析、多向誘導(dǎo)分化等方法鑒定其干細胞特性,采用新型植物誘導(dǎo)劑Conophylline(CNP)與其它誘導(dǎo)因子的不同組合將脂肪干細胞誘導(dǎo)分化為胰島樣細胞團,觀察不同組合的誘導(dǎo)分化效率,并利用特異性染色、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),免疫細胞化學(xué)等方法對誘導(dǎo)分化后的細胞團在基因水平與蛋白水平上進行鑒定,ELISA法檢測細胞團在不同濃度
3、葡萄糖刺激下胰島素的分泌情況,最后將誘導(dǎo)后的胰島樣細胞團移植到Ⅰ型糖尿病小鼠體內(nèi),觀察小鼠血糖變化,評價其對血糖水平的調(diào)節(jié)作用。
結(jié)果:數(shù)據(jù)顯示脂肪干細胞具有多能干細胞特性,可誘導(dǎo)分化為具有胰島素分泌和葡萄糖濃度反應(yīng)性類胰島細胞團;Conophylline與尼克酰胺聯(lián)合誘導(dǎo)可大幅度提高誘導(dǎo)分化效率;移植ILCs的糖尿病小鼠血糖水平在一周內(nèi)恢復(fù)正常。
結(jié)論:脂肪干細胞具有廣闊的臨床應(yīng)用前景,具備用來替代異體胰島組織通過
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