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2、導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果,指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě),文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:璐攤章:季孢列廬至月泌日中文摘要TGF131誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞向腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的EMT機(jī)制研究以及化療對(duì)干細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)的影響中文摘要第一部分:TGFpl誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞向腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的EMT機(jī)制研究目的:通過(guò)TGF131誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞發(fā)生的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epit
3、helialmesenchymaltransition,EMT),研究EMT能否使腫瘤干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)發(fā)生變化,并討論其意義。方法:將人乳腺癌細(xì)胞株MCF7置于37℃,飽和濕度5%C02,含10%胎牛血清I沖Ⅶ1640培養(yǎng)基中進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng),待細(xì)胞進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后用于實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分兩組,實(shí)驗(yàn)組MCF7細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)加入TGFp1,使其濃度達(dá)到lOng/ml,對(duì)照組加入等量PBS液。1TGFDl誘導(dǎo)培養(yǎng)MCF7細(xì)胞發(fā)生EMT的形態(tài)學(xué)觀察:將
4、TGFp1作用于MCF7細(xì)胞株,在倒置相差顯微鏡下定時(shí)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化。2細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)(MTT法)檢測(cè)TGFp1對(duì)細(xì)胞增殖的影響。3應(yīng)用24孔Transwell侵襲小室進(jìn)行MCF7細(xì)胞的侵襲試驗(yàn),檢測(cè)TGFB1對(duì)MCF7細(xì)胞株侵襲能力的影響。應(yīng)用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)TGFDl對(duì)MCF7細(xì)胞株遷移能力的影響。4RTPCR檢測(cè)TGFp1處理72h后細(xì)胞中干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物Oct4基因和EMT相關(guān)標(biāo)記物Ecadherin基因、Ncadherin基
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