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文檔簡介
1、目的:研究Crocin對人膀胱癌T24細胞株是否具有抑制作用,并進一步作機制探討,為Crocin作為一種高效無毒的天然藥物治療膀胱癌奠定理論基礎。 方法:④體外培養(yǎng)人膀胱癌T24細胞株。Crocin處理后,應用MTT實驗觀察細胞毒性作用,倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)改變,流式細胞術檢測細胞周期變化和細胞凋亡,RT-PCR和Westemblot檢測Bcl-2、Bax表達。②建立人膀胱癌T24細胞株裸鼠移植瘤動物模型。Crocin處理后,
2、觀察其對腫瘤的抑制作用,光鏡、電鏡觀察腫瘤組織形態(tài)改變,RT-PCR檢測Bcl-2、BaxmRNA表達,SP-免疫組織化學法分析Bcl-2、Bax、survivin、CyclinDl蛋白表達。 結果:①體外實驗:MTT結果顯示Crocin呈劑量依賴性和時間依賴性抑制人膀胱癌T24細胞的生長;光鏡觀察Crocin處理后T24細胞出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學改變;流式細胞術顯示Crocin對細胞周期的影響存在時間依賴性,并呈明顯的G0/Gl期阻
3、滯現(xiàn)象,細胞凋亡率隨Crocin作用時間的延長逐漸增加;RT-PCR和Westemblot的檢測結果顯示T24細胞經Crocin處理后,其Bcl-2的表達水平下降,而Bax的表達水平上調。②動物實驗:Crocin對人膀胱癌裸鼠移植瘤的生長具有抑制作用,抑制率達28.7%。用藥期間裸鼠生長良好,表明Crocin無明顯的毒副作用;光鏡顯示經Crocin處理后腫瘤標本內出現(xiàn)片狀壞死灶;電鏡觀察可見各期凋亡細胞及凋亡小體;RT-PCR檢測結果顯
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