染料木黃酮對人結(jié)腸癌SW620細胞株增殖、凋亡影響的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究染料木黃酮(genistein,Gen)對人結(jié)腸癌SW620細胞株增殖、凋亡、細胞周期分布及其對SW620細胞Survivin和Bcl-2mRNA表達的影響,探討Gen在SW620細胞凋亡過程中可能的作用機制。
  方法:體外培養(yǎng)人結(jié)腸癌SW620細胞株:1.用MTT法檢測不同濃度(6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen處理SW620細胞后,SW620

2、細胞的生長抑制效應(yīng);2.流式細胞技術(shù)檢測不同濃度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen處理SW620細胞48h后,SW620細胞凋亡和細胞周期分布的變化;3。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶連反應(yīng)(RT-PCR)檢測不同濃度(25μmaol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細胞48h后,Gen對SW620細胞Survivin、Bcl-2 mRNA表達的影響。4.實驗結(jié)果用SPSS19.0進行統(tǒng)

3、計分析,以P<0.05作為有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1.MTT結(jié)果顯示,不同濃度(6.25μmol/L、12.5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細胞24h、48h、72h后,均可抑制SW620細胞的增殖;且隨著Gen濃度的增加和作用時間的延長,Gen對SW620細胞增殖的抑制作用逐漸增強,呈現(xiàn)出時間-濃度依賴性,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。2.不同濃度(25μmol/L、50

4、μmol/L、100μmol/L)的Gen對SW620細胞作用48h后,SW620細胞凋亡及周期分布檢測:不用濃度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細胞48h后,其早期凋亡率和晚期凋亡率明顯增高;隨著Gen濃度的增加,SW620細胞的早期凋亡率和晚期凋亡率也逐漸增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);隨著Gen濃度的不斷增高,細胞周期分布發(fā)生明顯的變化,表現(xiàn)為G0/G1期細胞數(shù)目比例逐漸下

5、降,S期細胞細胞數(shù)目比例明顯上升,G2/M期細胞數(shù)目逐漸減少,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示隨著Gen濃度的增高可使SW620細胞被阻滯在S期,3.RT-PCR結(jié)果顯示,不同濃度(25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)的Gen作用于SW620細胞48h后,Survivin、Bcl-2 mRNA在人結(jié)腸癌SW620細胞中的表達均下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  結(jié)論:1.Gen在一定的濃度范圍內(nèi)

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