烏司他丁對急性肝功能衰竭大鼠凋亡相關(guān)蛋白Bad、Bax的影響.pdf

1、目的： 觀察急性肝衰竭大鼠肝臟Bad、Bax蛋白的表達(dá)及烏司他丁(UTI)對其影響，探討UTI防治急性肝衰竭的作用機(jī)制。 方法： 1.健康雄性SD大鼠186只：正常對照組6只，模型組75只，治療組75只，模型組和治療組再各留15只大鼠觀察造模后大鼠每天的生存情況。模型組和治療組造模后6、12、24、36和48h按隨機(jī)數(shù)字表分別隨機(jī)取6只處死，留取標(biāo)本用于觀察和檢測各項指標(biāo)。 2.模型組和治療組均以D-氨基

2、半乳糖(D-Gal)800mg/kg聯(lián)合內(nèi)毒素(LPS)40μg/kg腹腔內(nèi)注射誘導(dǎo)大鼠急性肝衰竭模型，正常組予以生理鹽水腹腔注射；治療組在造模結(jié)束后立即按1×105U/kg腹腔注射UTI，其余兩組腹腔注射同等量生理鹽水。 3.觀察各組大鼠24h存活率。取肝組織，采用蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡下觀察肝組織損傷情況，采用免疫組織化學(xué)方法檢測不同時間點肝組織中Bad、Bax蛋白的表達(dá)。同時測定各時間點血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、

3、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TB)、TNF-α及肝組織丙二醛(MDA)變化。 結(jié)果： 1.D-Gal800mg/kg聯(lián)合LPS40μg/kg腹腔注射成功構(gòu)建了大鼠急性肝衰竭模型：24h存活率為40％；血清TNF-α于6h表現(xiàn)為最高，12h開始下降，36h已降為正常；TB于6h開始升高，36h達(dá)到峰值；各時間點血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、及肝組織丙二醛(MDA)含量和Bad、Bax蛋白的表

4、達(dá)均較正常組明顯增高，并于24h達(dá)到高峰(P<0.01)；病理學(xué)可見肝組織結(jié)構(gòu)紊亂，大量肝細(xì)胞腫脹變性，并有不同程度的肝細(xì)胞壞死。 2.治療組與對照組各指標(biāo)比較： ①治療組大鼠24h存活率明顯高于對照組，66.7％ VS40％，P<0.05。 ②TNF-α在UTI治療6h開始即有明顯下降(P<0.01)；12h開始各時間點血清ALT、AST水平及肝臟MDA含量均低于模型組(P<0.01)，且肝臟Bad、Bax蛋白

5、的表達(dá)量均少于模型組(P<0.05)。UTI治療后6h、12h血清TB無顯著變化(P>0.01)，24h開始各時間點較模型組均有明顯降低(P<0.01或P<0.05)。 結(jié)論： 1.D-Gal800mg/kg聯(lián)合LPS40μg/kg腹腔注射成功構(gòu)建了大鼠急性肝衰竭模型；其可能機(jī)制為通過誘導(dǎo)肝組織脂質(zhì)過氧化及TNF-α的表達(dá)增加從而上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白Bad、Bax的表達(dá)而導(dǎo)致急性肝衰竭。 2.UTI對大鼠急性肝衰竭有