絞股藍皂苷對原代培養(yǎng)胚鼠中腦多巴胺能神經(jīng)細胞的保護作用.pdf

1、帕金森病(PD)的主要病理改變是中腦黑質(zhì)多巴胺(DA)能神經(jīng)元的變性和死亡，目前對PD的治療仍以控制癥狀為主，尚無有效方法緩解病情進展，藥物的副作用更是嚴重影響治療效果。絞股藍早已廣泛應用于中醫(yī)方劑，長期食用無毒副作用。研究顯示絞股藍中提取的多種有效成分作為抗氧化劑的神經(jīng)保護作用很多。我們希望通過檢測絞股藍皂苷(GPs)對體外培養(yǎng)原代中腦神經(jīng)細胞的保護作用，篩選最佳藥物濃度和時間，觀察其抗凋亡和抗氧化作用，為GPs用于臨床治療PD提供實

2、驗依據(jù)。
　　目的：探討GPs對原代培養(yǎng)的胚鼠中腦DA能神經(jīng)細胞的保護作用。
　　方法：原代培養(yǎng)胎鼠中腦腹側(cè)神經(jīng)細胞，分別應用100、200、400、800μg/mLGPs作用6h、12h、24h、48h、72h、96h，同時設空白對照組和陽性對照(NGF)組，應用MTT比色試驗檢測GPs對細胞活性的影響，篩選GPs最佳濃度和作用時間。免疫細胞化學染色檢測抗酪氨酸羥化酶(TH)的表達；應用1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-

3、四氫吡啶(MPTP)誘導細胞損傷，同時設空白對照組和GPs預處理組，應用免疫細胞化學染色和流式細胞儀分別檢測誘導型一氧化氮合酶(iNOS)的表達和細胞凋亡。
　　結(jié)果：MTT檢測結(jié)果顯示400μg/mLGPs作用48h后細胞吸光值為(1.006±0.062)，與NGF組比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，與實驗組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。TH免疫染色顯示400μg/mLGPs組和NGF組TH陽性細胞數(shù)均高于空白對照組