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文檔簡(jiǎn)介
1、帕金森病(PD)的主要病理改變是中腦黑質(zhì)多巴胺(DA)能神經(jīng)元的變性和死亡,目前對(duì)PD的治療仍以控制癥狀為主,尚無(wú)有效方法緩解病情進(jìn)展,藥物的副作用更是嚴(yán)重影響治療效果。絞股藍(lán)早已廣泛應(yīng)用于中醫(yī)方劑,長(zhǎng)期食用無(wú)毒副作用。研究顯示絞股藍(lán)中提取的多種有效成分作為抗氧化劑的神經(jīng)保護(hù)作用很多。我們希望通過(guò)檢測(cè)絞股藍(lán)皂苷(GPs)對(duì)體外培養(yǎng)原代中腦神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用,篩選最佳藥物濃度和時(shí)間,觀(guān)察其抗凋亡和抗氧化作用,為GPs用于臨床治療PD提供實(shí)
2、驗(yàn)依據(jù)。
目的:探討GPs對(duì)原代培養(yǎng)的胚鼠中腦DA能神經(jīng)細(xì)胞的保護(hù)作用。
方法:原代培養(yǎng)胎鼠中腦腹側(cè)神經(jīng)細(xì)胞,分別應(yīng)用100、200、400、800μg/mLGPs作用6h、12h、24h、48h、72h、96h,同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照(NGF)組,應(yīng)用MTT比色試驗(yàn)檢測(cè)GPs對(duì)細(xì)胞活性的影響,篩選GPs最佳濃度和作用時(shí)間。免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)抗酪氨酸羥化酶(TH)的表達(dá);應(yīng)用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-
3、四氫吡啶(MPTP)誘導(dǎo)細(xì)胞損傷,同時(shí)設(shè)空白對(duì)照組和GPs預(yù)處理組,應(yīng)用免疫細(xì)胞化學(xué)染色和流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)的表達(dá)和細(xì)胞凋亡。
結(jié)果:MTT檢測(cè)結(jié)果顯示400μg/mLGPs作用48h后細(xì)胞吸光值為(1.006±0.062),與NGF組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),與實(shí)驗(yàn)組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。TH免疫染色顯示400μg/mLGPs組和NGF組TH陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均高于空白對(duì)照組
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