抑癌基因PDCD4抑制人上皮性卵巢癌惡性行為的研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文抑癌基因PDCD4抑制人上皮性卵巢癌惡性行為的研究姓名：魏增濤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：婦產(chǎn)科學(xué)指導(dǎo)教師：傅慶詔張利寧20091022山東大學(xué)博學(xué)位論文◆PDCD4對(duì)上皮性卵巢癌細(xì)胞惡性行為影響的實(shí)驗(yàn)研究◆超聲及微泡劑介導(dǎo)PDCD4基因抑制裸鼠卵巢癌移植瘤生長(zhǎng)的實(shí)驗(yàn)研究材料與方法一、PDCD4在漿液性囊腺癌組織中的表達(dá)及其臨床意義1臨床病例標(biāo)本及病歷資料的收集：收集山東大學(xué)齊魯醫(yī)院、山東大學(xué)第二醫(yī)院、濟(jì)南市中心醫(yī)院婦科

2、20012007年間，年齡在3574歲(平均53歲)之間的69例漿液性腫瘤(26例漿液性囊腺瘤、43例漿液性囊腺癌)。20例對(duì)照組正常卵巢來(lái)自山東大學(xué)齊魯醫(yī)院、山東大學(xué)第二醫(yī)院、濟(jì)南市中心醫(yī)院婦科接受手術(shù)切除卵巢的非卵巢性疾病患者。臨床及病理資料調(diào)查來(lái)自43例漿液性囊腺癌患者，生存資料來(lái)自43例漿液性囊腺癌中的32位患者，疾病特異性生存時(shí)間是從手術(shù)時(shí)至因卵巢癌死亡或至調(diào)查時(shí)。2分別利用RTPCR和免疫組化方法檢測(cè)漿液性囊腺癌、漿液性囊腺

3、瘤及正常卵巢組織中PDCD4mRNA和蛋白的表達(dá)情況。3采用卡方檢驗(yàn)方法分析漿液性囊腺癌與正常卵巢、漿液性囊腺瘤組織中PDCD4表達(dá)的差異，采用卡方檢驗(yàn)方法分析PDCD4表達(dá)與漿液性囊腺癌患者臨床病理學(xué)特點(diǎn)的關(guān)系；采用KaplanMeier和Logrank檢驗(yàn)分析PDCD4表達(dá)與患者疾病特異性生存時(shí)間的關(guān)系；采用Cox回歸進(jìn)行多因素分析確定PDCD4表達(dá)是否為漿液性囊腺癌患者獨(dú)立的預(yù)后因素，若P值小于005fllJ認(rèn)為差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

4、。二、PI)CD4對(duì)上皮性卵巢癌細(xì)胞惡性行為影響的實(shí)驗(yàn)研究1按常規(guī)培養(yǎng)人上皮性卵巢癌細(xì)胞系SKOV3，3AO及CA03，利用帶有紅色熒光的真核表達(dá)載體pDsRed2N1(空載體)及pDsRed2N1PDCD4(PDCD4重組表達(dá)載體1分別轉(zhuǎn)染上述細(xì)胞，并利用未轉(zhuǎn)染的相應(yīng)細(xì)胞作為對(duì)照；利用熒光顯微鏡觀察、RTPCR及Westernblot技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染的效果。對(duì)于SKOV3細(xì)胞，利用30099／mL的G418篩選轉(zhuǎn)染陽(yáng)性的克隆，建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染