基于濁毒學(xué)說對慢性萎縮性胃炎的臨床研究及對胃癌BGC-823細(xì)胞株體外實驗研究.pdf

1、慢性萎縮性胃炎（CAG）是消化系統(tǒng)的一種常見病，是指炎癥導(dǎo)致的胃腺體破壞、減少、萎縮、甚至消失，表面上皮細(xì)胞喪失分泌能力，黏膜肌層增厚的病理、臨床病癥。上世紀(jì)40年代Schindle首次提出CAG的概念，1978年WHO將其列為胃癌的癌前疾病或癌前狀態(tài)，而在CAG基礎(chǔ)上伴發(fā)的腸上皮化生（IM）和異型增生（Dys），則是胃癌的癌前病變（PLGC），癌變的發(fā)生率較高。CAG及其癌前病變已成為目前研究的重點，及早識別、防治癌前疾病和癌前病變，

2、成為降低胃癌發(fā)生率和死亡率行之有效的方法。目前，西醫(yī)學(xué)治療本病尚缺乏有效的治療手段。中醫(yī)藥在治療CAG方面有著明顯的優(yōu)勢，其改善患者癥狀及預(yù)防疾病向癌轉(zhuǎn)化等方面的療效肯定且顯著。
　　 中醫(yī)學(xué)將CAG病變歸屬于“胃脘痛”、“胃痞”、“痞滿”、“嘈雜”等病證范疇。導(dǎo)師李佃貴教授認(rèn)為，隨著社會的發(fā)展，生活方式、飲食結(jié)構(gòu)的改變，環(huán)境因素變化，包括大氣污染等，現(xiàn)代人的精神社會壓力加大，疾病模式會發(fā)生變化。在臨床診療中觀察到許多慢性疾病患

3、者病情反復(fù)，纏綿難愈，常有顏面晦濁、暗滯，少澤，大便粘膩不爽，小便黃，舌質(zhì)暗紅，苔黃或黃膩，脈弦滑等脈證表現(xiàn)，李師在總結(jié)前人理論的基礎(chǔ)上，結(jié)合多年的臨證經(jīng)驗，提出“濁毒學(xué)說”，認(rèn)為濁毒既是一種對人體臟腑經(jīng)絡(luò)及氣血陰陽均能造成嚴(yán)重?fù)p害的致病因素，同時也是多種病因?qū)е屡K腑功能紊亂、氣血運行失常，機(jī)體內(nèi)產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物不能及時正常排出，蘊積體內(nèi)而化生的病理產(chǎn)物。其致病特點，（1）粘滯難解易阻遏氣機(jī)；（2）入血入絡(luò)易傷氣陰；（3）氣血失調(diào)易瘀易積

4、。濁毒為患所造成的病證，屬于濁毒證，是指以濁毒為病因使機(jī)體處于濁毒狀態(tài)從而產(chǎn)生特有臨床表現(xiàn)的一組或幾組證候群。運用濁毒學(xué)說指導(dǎo)CAG治療，初步取得了較為滿意的臨床療效。本研究旨在進(jìn)一步完善該學(xué)說在CAG的證候規(guī)律，探討化濁解毒方藥的作用機(jī)制。
　　 目前，中醫(yī)關(guān)于CAG的證候分型，行業(yè)學(xué)會及各家經(jīng)驗存在多種不同的觀點，如有肝胃不和、脾胃濕熱、濕濁中阻、胃絡(luò)瘀阻、脾胃虛弱、胃陰不足6個證型分類；有肝胃不和、脾胃虛弱（含虛寒）、脾胃

5、濕熱、胃陰不足、胃絡(luò)瘀阻、脾虛氣滯等證型分類；還有的分為氣陰兩虛，虛火灼胃和脾胃氣虛證型等等，繁雜不一，為臨床和科研工作帶來極大不便。
　　 中醫(yī)證候?qū)W研究是目前中醫(yī)藥研究工作的前沿領(lǐng)域，20年來，隨著統(tǒng)計學(xué)、流行病學(xué)、計量學(xué)、模糊數(shù)學(xué)等諸多學(xué)科知識的不斷滲透，被用于中醫(yī)證候診斷標(biāo)準(zhǔn)量化研究的方法也日益增多。聚類分析是將樣品個體或變量指標(biāo)按其具有的特性進(jìn)行分類的一種多元統(tǒng)計方法，分為樣品聚類分析和變量聚類分析，其目的是根據(jù)樣品或

6、指標(biāo)間相似程度的大小，將性質(zhì)相近的歸在同一類，而將性質(zhì)相差比較大的歸在不同的類，在中醫(yī)證候研究中的合理應(yīng)用能夠極大地提高中醫(yī)辨證的規(guī)范性和準(zhǔn)確性。
　　 本研究采用聚類分析的方法，分析CAG較大樣本病例的臨床表現(xiàn)，以期為臨床提供較為合理、科學(xué)、規(guī)范的辨證分型，同時，通過應(yīng)用本方法來探討濁毒證的證候規(guī)律。
　　 觀察CAG濁毒證患者的胃泌素（Gas）、胃動素（MTL）、生長抑素（SS）水平變化，探討CAG濁毒證證型與胃腸激

7、素之間的相關(guān)關(guān)系，進(jìn)一步明確胃腸激素的變化在CAG中醫(yī)證型中是否有特異性，胃腸激素變化異常是否能導(dǎo)致不同證型臨床征象，提高對本證型的認(rèn)識。
　　 CAG屬癌前疾病，CAG伴IM，被認(rèn)為是萎縮的典型標(biāo)志以及胃癌的前兆，通過上述分析，發(fā)現(xiàn)濁毒內(nèi)蘊是本病的主要證候特點，為此，創(chuàng)立了化濁解毒方，并觀察本方治療CAG的臨床療效。
　　 通過觀察化濁解毒方藥及其拆方含藥血清對體外培養(yǎng)的人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖和凋亡的影響，從實驗

8、研究方面，進(jìn)一步探討化濁解毒方藥在防治胃癌前病變中可能的作用機(jī)制。
　　 第一部分慢性萎縮性胃炎證候?qū)W聚類研究
　　 目的：采用變量聚類分析的方法，對CAG臨床資料進(jìn)行探索性的中醫(yī)證候分類研究，旨在應(yīng)用現(xiàn)代數(shù)理統(tǒng)計方法探索CAG較為規(guī)范的臨床證候分型，驗證濁毒證候的特點，為臨床辨證提供客觀依據(jù)。
　　 方法：采集河北省中醫(yī)院消化科門診及住院CAG患者，所有患者依照西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)確診為CAG，符合納入、排除標(biāo)準(zhǔn)。記錄

9、371例CAG患者的癥狀、體征、舌象和脈象等臨床資料，使用SAS軟件對56個變量進(jìn)行3-6類的聚類分析。
　　 小結(jié)：應(yīng)用變量聚類分析，同時結(jié)合臨床專家意見，能夠幫助進(jìn)行CAG中醫(yī)證候的合理分類，并對提出的CAG新的證候類型一濁毒內(nèi)蘊證進(jìn)行了較為規(guī)范、科學(xué)的驗證，為中醫(yī)辨證論治CAG提供一定較為合理、科學(xué)的理論依據(jù)。
　　 第二部分慢性萎縮性胃炎濁毒證與胃腸激素相關(guān)性研究
　　 目的：本研究旨在通過探討CAG濁毒

10、證與胃腸激素分泌變化規(guī)律相關(guān)性研究，以揭示CAG濁毒證患者胃腸激素的分泌特點，提高對濁毒證的認(rèn)識，為臨床診治提供客觀指標(biāo)方面的依據(jù)。
　　 方法：采集河北省中醫(yī)院2006年12月-2007年12月消化科門診及住院的CAG患者50例，所有患者據(jù)符合西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)辨證診斷標(biāo)準(zhǔn)，分為濁毒證組25例和脾虛證組25例，同時選取健康志愿者設(shè)立健康對照組25例。采用放射免疫法檢測患者血漿胃泌素（Gas）、胃動素（MTL）、生長抑素（SS）

11、的含量。
　　 小結(jié)：
　　 1.在CAG濁毒證患者中，血漿Gas、MTL的變化有證型特異性。
　　 2.血漿Gas、MTL的變化可能導(dǎo)致不同證型臨床征象。
　　 第三部分化濁解毒方治療慢性萎縮性胃炎臨床研究
　　 目的：本文旨在通過觀察化濁解毒方對CAG患者的癥狀積分、胃鏡像、病理學(xué)、Hp等方面的影響，探討該方治療CAG的臨床療效。
　　 方法：收集河北省中醫(yī)院消化科門診及住院的CAG患

12、者共92例，隨機(jī)分為治療組和對照組，治療組口服化濁解毒方治療，1袋/次，2次/日，早、晚空腹溫服。對照組口服中成藥胃復(fù)春4片/次，3次/日。12周為1個療程，連用2個療程。
　　 小結(jié)：
　　 1.化濁解毒方能夠較好改善CAG患者的臨床癥狀。
　　 2.化濁解毒方對胃黏膜的恢復(fù)、腸上皮化生的改善有較好療效。
　　 3.化濁解毒方有一定的抗Hp感染作用。
　　 第四部分化濁解毒方藥及其拆方含藥血清對

13、人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖和凋亡的影響
　　 目的：本課題旨在通過觀察化濁解毒方藥及其拆方含藥血清對人胃癌BGC-823細(xì)胞增殖和凋亡的影響，探討該方藥是否通過抑制細(xì)胞增殖作用機(jī)制，預(yù)防CAG癌前病變，為該方藥臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.含藥血清的制備：SD大鼠，雄性，隨機(jī)分為4組：空白對照組、化濁解毒方組、化濁方組、解毒方組。實驗組分別按345.9g·kg-1·d-1、208.4g·kg-

14、1·d-1、137.3g·kg-1·d-1。劑量灌胃，空白對照組2ml生理鹽水灌胃，1次/日，共3次。末次給藥后2h，常規(guī)分離血清保存。
　　 2.給藥及分組：分別以各組的含藥血清對胃腺癌BGC-823細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，分為空白對照組、化濁解毒方組、化濁方組、解毒方組4組。
　　 3.檢測指標(biāo)：分別采用MTT、流式細(xì)胞術(shù)、免疫組化法檢測不同含藥血清對BGC-823細(xì)胞的生長抑制、細(xì)胞周期和凋亡率的影響及BGC-823細(xì)胞中B

15、cl-2、Bax蛋白的表達(dá)。
　　 小結(jié)：
　　 1.化濁解毒方可抑制人胃腺癌BGC-823細(xì)胞增殖，其作用機(jī)制可能與其干擾細(xì)胞周期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡有關(guān)。
　　 2.化濁解毒方及其拆方發(fā)揮誘導(dǎo)凋亡作用的機(jī)制可能是通過上調(diào)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)，下調(diào)凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達(dá)來實現(xiàn)的。
　　 3.化濁方、解毒方均能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而對細(xì)胞周期無影響。經(jīng)兩者配伍后的化濁解毒方不僅能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，而且能將細(xì)胞阻滯

16、于G0/G1期，因此其對胃腺癌BGC-823細(xì)胞抑制增殖作用明顯增強。
　　 結(jié)論：
　　 1.應(yīng)用變量聚類分析，能夠幫助進(jìn)行CAG中醫(yī)證候的合理分類，并探討CAG濁毒證證候特點，為中醫(yī)辨證論治CAG提供一定較為合理、科學(xué)的理論依據(jù)。
　　 2.在CAG濁毒證患者中，血清Gas、MTL的變化有證型特異性。血漿Gas、MTL的變化可能導(dǎo)致不同證型臨床征象。
　　 3.化濁解毒方藥能夠較好的改善CAG患者的臨