牛肉中玉米赤霉醇及其相關(guān)物多殘留檢測(cè)方法的研究.pdf

1、玉米赤霉醇屬于雷索酸內(nèi)酯類物質(zhì)，同類物質(zhì)還有β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇等，均具有雌激素樣作用，對(duì)人體和動(dòng)物健康可產(chǎn)生極大危害。本文旨在制備免疫親和色譜(IAC)柱，并建立同時(shí)檢測(cè)牛肉中玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇?xì)埩舻拿庖哂H和色譜-氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用(IAC-GC/MS)檢測(cè)方法及固相萃取-氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用(SPE-GC/MS)檢測(cè)方法，為監(jiān)測(cè)上述物質(zhì)殘留提

2、供方法手段。 采用玉米赤霉醇的單克隆抗體與溴化氰活化的瓊脂糖4B偶聯(lián)(偶聯(lián)率為96.3％)，制備了免疫親和色譜柱，玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮和α-玉米赤霉烯醇的動(dòng)態(tài)柱容量分別為2639.7、2840.3、2731.5、2736.3ng/mLgel，絕對(duì)柱容量分別為406.1、437.0、420.2、421.0ng/mgMAb。選擇甲醇/水(30+70，v/v)為洗滌劑，甲醇為洗脫劑。20天內(nèi)重復(fù)使用15次后，動(dòng)態(tài)柱容

3、量下降至1236.4、1330.0、1175.8、1243.5ng/mLgel，仍能滿足殘留檢測(cè)的需要。 建立了檢測(cè)牛肉中4種雷索酸內(nèi)酯類物質(zhì)殘留的IAC-GC/MS方法。牛肉經(jīng)勻質(zhì)后，甲醇提取，冷凍去脂，提取液過(guò)IAC柱，然后用磷酸緩沖液(PBS)、水及甲醇/水(30+70，v/v)洗滌IAC柱，甲醇洗脫，N2吹干，衍生化，最后用GC/MS檢測(cè)。選擇m/z433作為玉米赤霉醇和β-玉米赤霉醇的定量離子，玉米赤霉酮為m/z449

4、，α-玉米赤霉烯醇為m/z446。采用外標(biāo)定量法，在0.4-20.0μg/L范圍內(nèi)成線性相關(guān)，相關(guān)系數(shù)大于0.995。檢測(cè)限為0.5ug/kg。在1.0-5.0μg/kg添加范圍內(nèi)，回收率為79.6％-110.7％，變異系數(shù)為3.2％-11.4％。 建立了檢測(cè)牛肉中4種雷索酸內(nèi)酯類物質(zhì)殘留的SPE-GC/MS方法。牛肉經(jīng)勻質(zhì)后，采用甲醇提取，正己烷去脂，氨基柱凈化，衍生化后GC/MS檢測(cè)。采用外標(biāo)定量法，在0.5-10.0μg/