MiRNA-92a可下調(diào)TrkA蛋白表達并促進神經(jīng)母細胞瘤增殖和遷移.pdf

1、目的:探討miRNA-92a是否調(diào)控TrkA蛋白的表達并影響神經(jīng)母細胞瘤的增殖和遷移能力。
　　方法:通過RT-q PCR技術(shù)檢測神經(jīng)母細胞瘤細胞系BE(2)-M17細胞在轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics或miRNA-92a inhibitor后miRNA-92a和TrkA mRNA的相對表達量,分別以U6和β-actin為內(nèi)參基因;流式細胞術(shù)測TrkA蛋白的表達變化;CCK-8法測細胞的增殖能力的變化;transwell小室

2、實驗分析對細胞遷移能力的影響。
　　結(jié)果:
　　1.RT-qPCR對miRNA-92a進行相對定量分析,結(jié)果顯示:與陰性對照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后miRNA-92a表達顯著上調(diào);轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后miRNA-92a表達顯著下調(diào)。
　　2.CCK-8法測細胞的增殖能力的變化,結(jié)果顯示:與陰性對照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后,細胞增殖能力顯著增強;轉(zhuǎn)染miRN

3、A-92a inhibitor后細胞增殖能力顯著降低。
　　3.transwell小室實驗分析對細胞遷移能力的影響,結(jié)果顯示:與陰性對照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后,細胞遷移能力顯著增強;轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后,細胞遷移能力顯著降低。
　　4.RT-qPCR對TrkA mRNA進行相對定量分析,結(jié)果顯示:與陰性對照組相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后TrkA mRNA水平明顯降

4、低;轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后TrkA mRNA水平明顯增高。
　　5.通過流式細胞術(shù)檢測TrkA蛋白,結(jié)果顯示:與陰性對照相比,轉(zhuǎn)染miRNA-92a mimics后TrkA蛋白表達顯著下調(diào);轉(zhuǎn)染miRNA-92a inhibitor后TrkA蛋白表達顯著上調(diào)。
　　結(jié)論:
　　1.miRNA-92a可顯著下調(diào)TrkA mRNA的表達水平;
　　2.miRNA-92a可顯著下調(diào)TrkA蛋白的表