miRNA-338調(diào)節(jié)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中CXCR4表達(dá)的研究.pdf

1、青島大學(xué)碩士學(xué)位論文miRNA--338調(diào)節(jié)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞中CXCR4表達(dá)的研究姓名：蔣志慧申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)（小兒外科）指導(dǎo)教師：董蒨20120601青島大學(xué)碩士學(xué)位論文p r e - m i r - 3 3 8 轉(zhuǎn)染濃度5 0 n l I ／L 為較佳轉(zhuǎn)染濃度。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)細(xì)胞內(nèi)m i R N A 一3 3 8 含量依次遞增的轉(zhuǎn)染組( I O n M ／L 組、3 0 n W L 組、5 0 n M ／L 組) C X

2、 C R 4 基因m R N A 相對(duì)光密度值分別為0 ．7 5 + _ 0 ．0 6 、0 ．5 8 ±O ．0 8 、0 ．2 4 ±0 ．0 5 ，依次降低，均明顯低于空白對(duì)照組1 ．1 l±O ．0 8 ，空載對(duì)照組1 ．0 4 ±0 ．0 8 ( P < 0 ．0 5 ) ，證實(shí)m i R N A - 3 3 8 明顯抑制了S H - S Y 5 Y 細(xì)胞內(nèi)C X C R 4 基因

3、的轉(zhuǎn)錄。而通過W e s t e r n - b l o t 蛋白印跡法從蛋白表達(dá)水平進(jìn)一步檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率最高的5 0 n M ／L 組細(xì)胞的C X C R 4 蛋白相對(duì)表達(dá)量為0 ．2 4 _ + 0 ．0 6 ，而未轉(zhuǎn)染的空白對(duì)照組為0 ．5 6 ±0 ．0 8 ，m i R N A - 3 3 8 含量高的轉(zhuǎn)染組較含量低的未轉(zhuǎn)染組C X C R 4 蛋白表達(dá)明顯下調(diào)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P < 0 ．0 5 )

4、，證明m i R N A 一3 3 8 明顯抑制了S H —S Y 5 Y 細(xì)胞內(nèi)C X C R 4 蛋白的表達(dá)。結(jié)論人工合成的p r e - m i r - 3 3 8 可成功轉(zhuǎn)染入人神經(jīng)母細(xì)胞瘤S H —S Y 5 Y 細(xì)胞造成m i R N A - 3 3 8 過表達(dá)。m i R N A - 3 3 8 能夠下調(diào)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞C X C R 4m R N A 及蛋白的表達(dá)參與調(diào)節(jié)腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移，而利用生物信息數(shù)據(jù)庫尋找m i