人肝星形細(xì)胞中miR-126對(duì)IkBα及NF-kB的調(diào)控作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：通過(guò)分子生物學(xué)的方法，從分子水平了解在肝星狀細(xì)胞中miR-126對(duì)Iκ Bα是否有調(diào)控作用，進(jìn)而評(píng)價(jià)miR-126、IκBα、NF-κB在肝纖維化中的作用，為深入研究肝纖維化的發(fā)病機(jī)制提供新的思路，并為肝纖維化的生物治療提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。
　　 方法：⑴生物信息學(xué)技術(shù)選擇實(shí)驗(yàn)靶基因。⑵培養(yǎng)人肝星狀細(xì)胞株LX-2。⑶將合成的miRNA mimic、inhibitor轉(zhuǎn)染至人肝星狀細(xì)胞株LX-2。⑷轉(zhuǎn)染24h后，通過(guò)qP

2、CR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞IκBα mRNA的表達(dá)。⑸轉(zhuǎn)染48h后，通過(guò)Western Blot檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞胞漿IκBα蛋白和胞核NF-κB蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果：①轉(zhuǎn)染24h后，miR-126 mimic組與Negative Control mimic組，miR-126inhibitor組與Negative Control inhibitor組分別比較，IκBα mRNA表達(dá)量均無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。②轉(zhuǎn)染48h后，m

3、iR-126 mimic組LX2細(xì)胞胞漿的IκBα蛋白表達(dá)量較Negative Control mimic組顯著降低，兩者比較差異有顯著性（P＜0.05），胞核NF-κB蛋白表達(dá)量較Negative Control mimic組顯著升高，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05);而miR-126 inhibitor組胞漿的IκBα蛋白表達(dá)量較Negative Controlinhibitor組顯著升高，兩者比較差異有顯著性(P＜0.05)，