As-,2-O-,3-下調(diào)MG-63骨肉瘤細胞IEX-1基因表達的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：As2O3是中國傳統(tǒng)中藥砒霜的主要有效成分，最早應(yīng)用于血液系統(tǒng)腫瘤的治療，隨后研究表明其對實體瘤也具有抑制細胞增殖并誘導(dǎo)凋亡的作用。本研究小組早期研究發(fā)現(xiàn)，1.0μmol/L的As2O3可以體外誘導(dǎo)骨肉瘤細胞系MG-63細胞凋亡，進一步的cDNAArray，RT-PCR，Northern Blot證實細胞凋亡與As2O3干預(yù)后IEX-1基因表達下調(diào)有關(guān)。本研究擬深入探討As2O3干預(yù)MG-63細胞下調(diào)IEX-1基因表達轉(zhuǎn)錄調(diào)控機制

2、。 方法：采用PCR方法從外周血gDNA中擴增出IEX-1基因的啟動子及調(diào)控序列，連入螢光素酶報告基因載體，通過雙螢光素酶分析As2O3干預(yù)對IEX-1基因啟動子轉(zhuǎn)錄活性的影響；[γ-32P]ATP末端標記EMSA分析IEX-1啟動子順式作用元件與p53結(jié)合；Western Blot檢測As2O3干預(yù)后p53及IEX-1蛋白表達水平的改變。 結(jié)果：發(fā)現(xiàn)As2O3干預(yù)骨肉瘤細胞系MG-63后能誘導(dǎo)p53蛋白表達上調(diào)，增加的

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