碳酸酐酶抑制劑甲苯磺烷唑胺非臨床藥代動(dòng)力學(xué)特征.pdf

1、背景:
　　急性高原反應(yīng)是由高原低氧所導(dǎo)致的一種常見的高原疾病,它的主要癥狀有頭疼、虛弱、乏力、惡心、失眠和食欲不振等。雖然這些癥狀看起來都不是很嚴(yán)重,但是如果不加以治療任其發(fā)展下去,這些癥狀可能會(huì)轉(zhuǎn)變成危及生命的高原腦水腫和高原肺水腫。我國是世界上高原面積最大、海拔最高、居住人口最多的國家,隨著越來越多的旅游者和高原從業(yè)者來到高原,急性高原反應(yīng)日益成為影響健康的突出問題。
　　醋氮酰胺是一種典型的碳酸酐酶抑制劑,近年來已成

2、為治療急性高原反應(yīng)的關(guān)鍵性藥物。但是醋氮酰胺容易引起高氯性代謝性酸中毒、四肢麻木、耳鳴、食欲降低、味覺改變和胃腸道不適、意識(shí)模糊等不良反應(yīng)。一般不良反應(yīng)發(fā)生率為64.1％,嚴(yán)重影響人體的作業(yè)能力,限制了其作為預(yù)防藥物的推廣使用。因此,尋找新的安全和有效的預(yù)防和治療急性高原反應(yīng)的藥物變得至關(guān)重要。
　　醋氮酰胺的衍生物甲苯磺烷唑胺是我們發(fā)現(xiàn)的一種新型的碳酸酐酶抑制劑,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明它可以顯著抑制碳酸酐酶Ⅱ的活性,明顯提高小鼠耐

3、低氧能力,其作用顯著強(qiáng)于醋氮酰胺(密閉缺氧實(shí)驗(yàn)中甲苯磺烷唑胺和醋氮酰胺抗缺氧的最小有效劑量分別是6.25mg·kg-1·d-1及100mg·kg-1·d-1,甲苯磺烷唑胺是醋氮酰胺效價(jià)的16倍)。
　　藥代動(dòng)力學(xué)研究在新藥的發(fā)現(xiàn)和研發(fā)過程中發(fā)揮著越來越重要的作用,它不僅可以為毒性研究和臨床研究提供依據(jù),而且可以幫助優(yōu)化候選化合物。甲苯磺烷唑胺是國家1.1類創(chuàng)新藥物,其藥代動(dòng)力學(xué)特性國內(nèi)外尚無相關(guān)研究。因此,本課題的研究目的是探討大

4、鼠灌服甲苯磺烷唑胺后的藥代動(dòng)力學(xué)特征,組織分布特征,排泄特征以及甲苯磺烷唑胺與血漿蛋白結(jié)合的特征,揭示甲苯磺烷唑胺在大鼠體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律,獲得甲苯磺烷唑胺的基本藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),闡明甲苯磺烷唑胺吸收、分布和排泄的過程和特點(diǎn),為新藥研制和開發(fā)前景提供信息,為臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)提供依據(jù)。
　　方法:
　　生物樣品中甲苯磺烷唑胺采用液液萃取法進(jìn)行提取,采用HPLC-UV方法進(jìn)行檢測,并通過考察特異性、線性、精密度、準(zhǔn)確度、提取回收率和穩(wěn)

5、定性對所建立的生物樣品分析方法進(jìn)行驗(yàn)證。在藥代動(dòng)力學(xué)的研究中,我們分別測定了大鼠灌服和靜脈注射給藥后,不同時(shí)間點(diǎn)血漿中甲苯磺烷唑胺的濃度,采用藥代動(dòng)力學(xué)軟件非房室模型計(jì)算了相關(guān)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù),考察了大鼠灌服甲苯磺烷唑胺的絕對生物利用度以及藥物在大鼠體內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。在組織分布的研究中,我們探討了給藥后不同時(shí)間點(diǎn)甲苯磺烷唑胺在大鼠體內(nèi)各個(gè)組織中濃度的變化情況。在排泄的研究中,我們考察了大鼠灌服甲苯磺烷唑胺后,不同時(shí)間段原型藥物經(jīng)尿液、糞

6、便以及膽汁的排泄情況。在血漿蛋白結(jié)合率的研究中,我們通過平衡透析法考察了甲苯磺烷唑胺與大鼠及人血漿蛋白結(jié)合的特征。
　　結(jié)果:
　　第一部分:在所建立的色譜條件下,甲苯磺烷唑胺得到了很好的分離并且生物樣品中的內(nèi)源性物質(zhì)對測定無干擾;標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性良好,r>0.99;日內(nèi)、日間精密度都小于15%,準(zhǔn)確度在85%~115%之間;各生物樣品中甲苯磺烷唑胺的提取回收率都大于70%;實(shí)驗(yàn)條件下,甲苯磺烷唑胺比較穩(wěn)定。以上結(jié)果表明所建立

7、的分析方法靈敏可靠,滿足生物樣品分析的要求。
　　第二部分:大鼠灌服藥理劑量的甲苯磺烷唑胺(20、40和80mg·kg-1)后,血藥濃度在2h左右達(dá)峰,平均消除半衰期在5~7h之間,24h血藥濃度基本降低到峰濃度的1/10以下。大鼠灌服吸收較好,生物利用度約為60%。低、中、高3個(gè)劑量下,Cmax和AUC0-t分別為523±213、710±245、1626±266ng·mL-1和2730±1290、5580±1839、11438±

8、1637h·ng·mL-1,Cmax和AUC0-t都與給藥劑量有良好的線性關(guān)系,r分別為0.985和1,3個(gè)劑量的AUC0-t之比為1:2.0:4.2,表明在20~80mg·kg-1范圍內(nèi),大鼠灌服甲苯磺烷唑胺很可能呈現(xiàn)線性藥代動(dòng)力學(xué)特征。當(dāng)灌服劑量增加到400mg·kg-1時(shí),藥物在體內(nèi)的吸收降低,呈現(xiàn)飽和現(xiàn)象。此外,性別因素對大鼠灌服甲苯磺烷唑胺的藥代動(dòng)力學(xué)有顯著影響,幾乎各時(shí)間點(diǎn)雌性大鼠的濃度都高于雄性大鼠,雌性大鼠的Cmax和A

9、UC值約為雄性大鼠2倍,而CL/F和Vd/F值,雌性大鼠顯著低于雄性大鼠。
　　第三部分:大鼠灌服甲苯磺烷唑胺后,藥物在體內(nèi)分布迅速且廣泛,30min就可以在所測的各個(gè)組織中檢測到甲苯磺烷唑胺,2h甲苯磺烷唑胺在大部分組織中達(dá)到峰值,并且到8h各組織中甲苯磺烷唑胺的濃度一直維持在一個(gè)相對較高的水平,24h大部分組織中甲苯磺烷唑胺的濃度降低到峰值的50%以下。除胃腸外,甲苯磺烷唑胺在脾、腎、肺中的分布較多,提示這些組織很可能是藥理作

10、用的靶器官。此外,研究發(fā)現(xiàn)甲苯磺烷唑胺在大鼠腎臟中的分布存在性別差異,雌性大鼠腎臟中的藥物濃度明顯高于雄性大鼠。
　　第四部分:大鼠灌服甲苯磺烷唑胺后,72h經(jīng)尿液和糞便排泄的原型藥物分別為0.016%±0.019%和1.115%±0.506%,24h經(jīng)膽汁排泄的原型藥物為0.0148%±0.0072%,總排泄率小于2%,表明甲苯磺烷唑胺在大鼠體內(nèi)發(fā)生了廣泛代謝。
　　第五部分:甲苯磺烷唑胺與大鼠及人的平均血漿蛋白結(jié)合率分別

11、為96.03%±0.10%和94.24%±0.52%,3個(gè)濃度組間大鼠和人血漿蛋白結(jié)合率均無顯著性差異(P>0.05),表明甲苯磺烷唑胺與血漿蛋白的結(jié)合無濃度依賴性。
　　結(jié)論:
　　本研究首次建立了生物樣品中甲苯磺烷唑胺的分析方法,并用所建立的分析方法,以大鼠為實(shí)驗(yàn)對象,首次研究了甲苯磺烷唑胺的藥代動(dòng)力學(xué)、組織分布、排泄以及血漿蛋白結(jié)合的特征。大鼠灌服甲苯磺烷唑胺后,吸收快速,生物利用度高,約為60%;藥物在組織中分布快速