P物質及其介導的神經源性炎癥在小鼠免疫性肝炎中的作用研究.pdf

1、目的：通過尾靜脈注射刀豆蛋白A建立小鼠免疫性肝炎模型，觀察肝勻漿中P物質(substance P,SP)含量及其受體神經激肽-1受體(Neurokinin-lreceptor,NK-1R)在肝組織中的表達，以揭示SP介導的神經源性炎癥在肝炎的發(fā)生、發(fā)展中的可能作用；同時從血清學、組織學和細胞因子表達方面研究NK-1R受體阻滯劑L-703，606對小鼠免疫性肝炎模型的干預作用，進一步證實肝炎的起始和擴大中的神經內分泌機制，并為臨床上各型肝

2、炎的治療提供實驗依據。 方法：60只雌性小鼠隨機平分為三組：①生理鹽水對照組：予尾靜脈注射生理鹽水0.2ml；②刀豆球蛋白A(Con A)免疫性肝炎模型組：尾靜脈注射ConA(20 mg/kg)；③L-703，606干預組：在接受等量ConA注射前30分鐘尾靜脈注射L-703，606(10 mg/kg)。給藥6小時后，水合氯醛麻醉小鼠，眼眶取血，然后處死所有小鼠并取出肝臟，分別應用酶聯免疫吸附(ELISA)法與RT-PCR法測定

3、對照組和模型組肝臟組織中P物質含量及其受體NK-1R mRNA的相對定量表達；同時分別檢測各組血清中ALT、AST水平，HE染色觀察肝臟病理變化，實時熒光定量PCR測定肝臟組織中TNF-a和IFNI-γmRNA的表達情況。 結果：(1)模型組肝組織勻漿中SP含量顯著高于對照組：而且模型組NK-1R mRNA的表達顯著上調：(2)病理觀察：模型組可見肝細胞索破壞，肝竇稍增寬，內有大量瘀血，肝細胞彌漫性腫脹，核固縮、溶解甚至消失，點

4、、灶狀及片狀壞死多見，匯管區(qū)及中央靜脈肝竇內可見中性粒細胞和淋巴細胞浸潤；而干預組上述肝組織病理改變明顯減輕，肝細胞腫脹壞死及淋巴細胞浸潤也較模型組明顯改善；(3)模型組與干預組血清AST、ALT水平均大幅升高(P<0.01)，但與模型組相比，干預組ALT和AST明顯下降，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；(4)干預組肝組織TNF-a和IFN-γmRNA表達水平較模型組顯著下調(P<0.05)。 結論： 1.本實驗成功

5、建立了小鼠免疫性肝炎模型，組織病理顯示模型組肝臟點、灶狀及片狀壞死多見，匯管區(qū)及中央靜脈肝竇內可見中性粒細胞和淋巴細胞浸潤。 2.模型組肝組織勻漿SP含量及其受體NK-1R mRNA的表達顯著高于對照組，證明SP介導的神經源性炎癥在肝炎的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮重要的作用。 3.NK-1R受體阻滯劑L-703,606干預，可使血清AST、ALT水平、肝臟組織病理變化及肝組織TNF-a和IFN-γmRNA表達水平明顯下降，證明