siRNA對宮頸癌Hela細(xì)胞HPV18型E6、E7基因干擾作用的研究.pdf

1、} ＆R 日?專量大季碩士學(xué)位論文s i R N A 對富頸癌H c l a 細(xì)胞H P V l 8 型l 氓u 7 韭聞干擾作用的研究精導(dǎo)教師學(xué)講專業(yè)名稱磅文提囊日期玲史蕃辯日期答辯垂女套主席E 萍拼竹梅刑牧授婀產(chǎn)科學(xué)帥旭救授中文摘要E f f e c t o fs m a l li n t e r f e r e n c e R N A O UE 6 ，E 7g e n eo fh u m a np a p i l l o m a

2、v i r u s t y p c 一1 8 i n c e r v i c a lc a f l e e rc e l l sA b s t r a c tO b j e c t i v e T os t u d y t h ee f f e c to f s m a l li n t e r f e r e n c eR N A o nE 6 ．E 7 m R N A o f h u m a np a p i l l o m a v

3、 i r u st y p e 一1 8 ( H P V l 8 ) i nc e r v i c a l c a n c e rc e l l sa n d i t st h e r a p ya c t i o n t oc e r v i c a lc a n c e r ．M e t h o d s T h e s p e c i f i c H P V l 8 E 6 a n d E 7 s i R N A s y n t h

4、 e s i z e d b y i n v i r t r ot r a n s c r i p t i o n ．T h ec e l la c t i v i t yw a s d e t e c t e db ym e t h y lt h i a z o l y lt e t r a z o l i u m ( M T r ) a s s a yt o d e t e r m i n et h e m o s ts u i t

5、 a b l e c o n c e n t r a t i o n ，t h e nc e l l s w e r et r a n s f e c t e di n t o H P V l 8c e r v i c a l c a n c e r c e i l s b y o l i g o f e c t a m i n e ．H P V 18 E 6 ，E 7m R N Al e v e l w a se x a m i n

6、e d b ys e m i - q u a n t i t a t i v eR T - P C R ，a n d t h ec e l lc y c l e sw e r ea n a l y z e d b y f l o wc y t o m e t r y ．R e s u l t s n l e a c t i v i t y o f t h e H e L a c e l l s h a d a l l o b v i o

7、 u s s u p p r e s s i o n a f t e rt r a n s f e c t i o n t o O ．5 7 士0 ．0 5 a n d 0 ．6 2 士0 ．0 4 c o m p a r e dw i t } lt h ec o n t r a s to f0 ．8 7 士0 。0 5 ．T h ee x p r e s s i o n o f E 6m R N A l e v e lw a sO ．

8、6 3 土0 ．0 4 b e f o r et r a n s f e c t i o n ，d e c r e a s e dt oO ．5 3 土0 ．0 4 ，O ．4 6 士0 ．0 2 ，0 ．5 6 士0 ．0 3 e v i d e n t l ya f t e rt r a n s f e c t i o na t2 4 ，4 8 ，7 2h o u r s ；n l ee x p r e s s i o no fH

9、P V l 8 E 7m R N A l e v e lw a s0 6 6 土0 ．0 3b e f o r et r a n s f e c t i o na n dd e c r e a s e dt o0 ．6 0 士0 ．0 5 ．O ．5 2 士00 4 ，0 ．5 9 土0 ．0 2 a f t e rt r a n s f e c t i o na t 2 4 ，4 8 ，7 2h o u r s ；T h en u m

10、 b e ro f c e l l si n G 2p h a s eW a si n c r e a s e da f t e rH P V l 8 E 6 s i R N A t r a n s f e c t i o nf r o m ( 1 ．4 士1 ．2 ) ％t o ( 6 6 ．9 士35 )％，Sp h a s e w a s d e c l i n e df r o m ( 3 9 ．4 1 0 ．4 ) ％t o

11、( 0 士5 ．5 ) ％，a n dt h e yw e r e ( 4 7 ．2 士0 ．5 ) ％a n d ( 5 6 1 4 ．2 ) ％i n E 7 g r o u p ．C o n c l u s i o n s R N A i e x i t si nH e l a c e l l s ，a n di t ’S e f f e c th a s s p e c i f i c i t y ．P o s t g r a

12、d u a t e s t u d e n t ：W a n g p i n g ．( ( 諦n e e o l 0 留a n d O b s t e t r i c s )D h E t e d b y P r o f ．Z h u —m e iC u i[ K e yW o r d s ] s m a l l i n t e r f e r e n c eR N A ；H P V I S ；c e r v i c a l c a n