高壓氧對前列腺癌細胞生長影響的研究及其臨床應用價值的探討.pdf

1、一、研究背景： 目前隨著我國人口老齡化、人民生活水平的提高以及飲食結構的變化,前列腺癌發(fā)病率正呈逐年上升趨勢,對老年男性健康的影響正逐漸凸現(xiàn)出來。以上海地區(qū)為例,前列腺癌發(fā)病率在1985年是2.6/10萬男性人口,2000年增長到7.7/10萬男性人口,2005年已達到10/10萬男性人口。 高壓氧(hyperbaric oxygen,HBO)是指在海平面位置2-3倍標準大氣壓的環(huán)境下吸入100％的純氧,它可以使動脈血氧

2、分壓超過2000mmHg,組織氧分壓接近400mmHg。HBO引起的組織氧分壓升高以及氧輸送增加不依賴于血紅蛋白,如此高濃度的氧可以產(chǎn)生一系列生物化學、細胞學以及生理學方面有益的影響。HBO現(xiàn)已被廣泛應用于臨床之中,對于惡性腫瘤理論上講HBO能夠消除腫瘤自身缺氧所產(chǎn)生對于放療、化療等治療的抵抗性,從而提高相關治療的療效。但是自1966年Johnson和Lauehlan首先報道HBO可能具有促進腫瘤細胞生長的作用之后,陸續(xù)有類似的個案報道

3、出現(xiàn),更加劇了人們的擔心,此后很長一段時期惡性腫瘤及其病史被視為HBO治療的禁忌癥。目前HBO對于惡性腫瘤自然進程的確切影響仍不清楚,對于腫瘤細胞的生長是否具有促進生長作用仍存有爭論。多數(shù)學者認為HBO并不促進腫瘤細胞的生長,但是仍有相當多的研究結果不支持此觀點；于此同時,目前普遍認為HBO本身對于腫瘤細胞并沒有明確的殺傷作用,單獨使用HBO治療惡性腫瘤并不具有療效,其治療作用往往是通過與其它治療方法的聯(lián)合應用而得以實現(xiàn)。 通過

4、復習與本研究相關的文獻資料發(fā)現(xiàn),目前缺乏HBO對于前列腺癌細胞生長影響的實驗性研究；對于HBO在前列腺癌治療中的應用價值暫無實驗研究方面的依據(jù)。針對上述現(xiàn)狀,設計本課題擬研究以下兩方面問題：首先,HBO對于前列腺癌細胞的生長是否具有促進作用,臨床上應用HBO治療前列腺癌患者是否安全?其次,HBO對于前列腺癌細胞是否具有增強其對放療、化療等治療敏感性的實驗依據(jù),臨床中是否可以將HBO作為前列腺癌的輔助治療? 二、研究目的：

5、 1、研究高壓氧對前列腺癌LNCaP細胞株(激素依賴型)、PC-3細胞株(激素非依賴型)生長的影響； 2、探討高壓氧在前列腺癌治療中的應用價值。 三、研究方法： 1、將LNCaP細胞株、PC-3細胞株隨機分為對照組常壓常氧條件下培養(yǎng),實驗組每日進行1次0.25 MPa(1個標準大氣壓=0.1 MPa)高壓氧暴露,持續(xù)70分鐘,連續(xù)5日； 2、分別應用光學顯微鏡及透射電子顯微鏡、CCK-8細胞計數(shù)試劑盒、流

6、式細胞儀以及Transwell遷移小室,對所有兩組細胞的形態(tài)學、增殖能力、細胞周期分布以及遷移能力進行觀察比較； 3、構建PC-3細胞株對照組及實驗組SCID小鼠移植瘤模型,觀察并對比兩組移植瘤在生長體積變化、瘤體微血管密度(MVD)、以及瘤細胞增殖(Ki-67蛋白)與凋亡(p53、p27蛋白)方面的差異。 四、結果： 1、不同處理組的兩類細胞大體及超微形態(tài)結構對比均未發(fā)現(xiàn)明顯改變,細胞增殖及遷移能力均不存在顯著

7、性差異(p>0.05); 2、流式細胞儀檢測顯示高壓氧導致LNCaP、PC-3細胞株在G2/M期的蓄積； 3、成功建立兩組PC-3細胞株移植瘤動物模型,致瘤率為100％,腫瘤接種后第28天,對照組移植瘤體積為(433.6±12.8)mm3,實驗組為(425.8±13.9)mm3,兩組移植瘤生長體積變化差異無顯著性(p>0.05); 4、對照組移植瘤微血管密度及Ki-67、p53、p27蛋白表達的陽性細胞率分別為2

8、0.1±2.31、(50.6±7.3)％、(30.5±4.7)％、(85.3±6.4)％,實驗組分別為22.4±3.19、(55.2±6.7)％、(31.2±5.3)％、(80.4±5.7)％,病理學特征均無顯著性差異(p>0.05)。 五、結論： 1、高壓氧不促進前列腺癌細胞的增殖,對前列腺癌中新生血管也無明顯影響,高壓氧可能不會促進潛伏性前列腺癌的進展,即前列腺癌患者接受高壓氧療可能是安全的； 2、高壓氧促使