Th17細胞相關(guān)因子在葡萄膜炎并發(fā)性白內(nèi)障術(shù)后炎癥反應中作用的研究.pdf

1、葡萄膜炎是世界主要致盲眼病之一，是一組累及葡萄膜、視網(wǎng)膜、視網(wǎng)膜血管及玻璃體的炎性疾病，多見于中青年。Vogt-小柳原田綜合征和Behcet病是我國最常見的兩種慢性葡萄膜炎類型。慢性眼內(nèi)炎癥和長期應用皮質(zhì)類固醇激素導致的并發(fā)性白內(nèi)障是Vogt-小柳原田綜合征和Behcet病最常見的并發(fā)癥和主要致盲因素之一。
　　 目前為止，超聲乳化白內(nèi)障吸除聯(lián)合人工晶體植入是慢性葡萄膜炎并發(fā)性白內(nèi)障的首選手術(shù)方式。但是Vogt-小柳原田綜合征和

2、Behcet病患者白內(nèi)障手術(shù)后炎癥反應比年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者嚴重。這種嚴重的炎癥反應除與手術(shù)創(chuàng)傷直接導致的血-房水屏障受損及葡萄膜對創(chuàng)傷的過度敏感有關(guān)外，還和手術(shù)前后葡萄膜炎患者血清中促炎因子的水平增高有關(guān)。手術(shù)后由于眼內(nèi)炎癥導致的并發(fā)癥，如黃斑囊樣水腫，會明顯影響手術(shù)效果。因此，手術(shù)前后炎癥反應的控制是保證葡萄膜炎患者白內(nèi)障手術(shù)成功的關(guān)鍵。
　　 激光蛋白細胞檢測儀(1aser flare cell meter，LFCM)是通

3、過非接觸、定量、原位地檢查前房內(nèi)的蛋白和細胞數(shù)量來客觀評估葡萄膜炎癥程度。LFCM曾經(jīng)被用以評測白內(nèi)障患者植入不同人工晶體的生物相容性，以及手術(shù)后血-房水屏障受損的嚴重程度。還有學者報道了LFCM測得的房水閃輝值和多種慢性葡萄膜炎患者白內(nèi)障術(shù)后眼內(nèi)炎癥反應之間的緊密聯(lián)系。研究證實，LFCM是慢性葡萄膜炎患者白內(nèi)障術(shù)后隨訪時監(jiān)測眼內(nèi)炎癥反應的客觀有效方法。
　　 Th17細胞是近年新發(fā)現(xiàn)的與Th1和Th2表型和功能不同一類輔助性T

4、細胞。Th17細胞通過IL-17(interleukin-17)參與自身免疫性炎癥反應的發(fā)生和發(fā)展。和IL-23、IFN-γ和IL-27可以調(diào)節(jié)Th17細胞的生物學效應。目前，已有研究證實Th17細胞相關(guān)因子參與VKH綜合征和Behcet病發(fā)生發(fā)展。但其在VKH綜合征和Behcet病并發(fā)性白內(nèi)障術(shù)后炎癥反應中的作用目前還不清楚。本研究對此進行深入分析，以期揭示控制炎癥，提高手術(shù)成功率新途徑。
　　 第一章、Th17細胞相關(guān)因子在

5、Vogt-小柳原田綜合征并發(fā)白內(nèi)障患者手術(shù)后炎癥反應中的作用
　　 1.目的：
　　 研究Th17細胞相關(guān)因子在Vogt-小柳原田綜合征并發(fā)白內(nèi)障患者手術(shù)后眼內(nèi)炎癥反應中的作用。
　　 2.方法：
　　 2.1對9例(9只眼)Vogt-小柳原田綜合征并發(fā)的白內(nèi)障患者行超聲乳化聯(lián)合人工晶體植入手術(shù)。9例(9只眼)年齡相關(guān)性白內(nèi)障(7例)和先天性白內(nèi)障患者(2例)作為對照；所有患者由同一術(shù)者行標準超聲乳化白內(nèi)

6、障吸除聯(lián)合人工晶體植入術(shù);
　　 2.2應用激光蛋白細胞檢測儀定量檢測手術(shù)前后的前房蛋白濃度和細胞數(shù)量；
　　 2.3手術(shù)前和手術(shù)后第1、7、30、90天抽取患者外周靜脈血。手術(shù)過程中，留取房水、囊膜組織和部分Vogt-小柳原田綜合征患者虹膜組織。外周血分離獲得單核細胞加入rIL-23或rIL-27培養(yǎng)后收集上清液；
　　 2.4采用ELISA方法檢測血清、培養(yǎng)上清和房水中IL-17、IL-23、IFN-γ和IL

7、-27蛋白濃度。免疫組化分析晶狀體前囊膜和虹膜組織中IL-17R表達；
　　 2.5采用SPSS10.0軟件分析所得數(shù)據(jù)，P值小于等于0.05是為具有統(tǒng)計學意義。
　　 3.結(jié)果：
　　 3.1 VKH綜合征患者房水閃輝值在各時段都高于對照組。手術(shù)前，VKH綜合征患者組雖然處于炎癥靜止期，但房水閃輝值依舊比對照組稍高；術(shù)后第1天，兩組值差異顯著；術(shù)后第7天和第30天依舊存在明顯差異。直到術(shù)后90天恢復術(shù)前水平。手

8、術(shù)前，VKH綜合征患者和對照組房水細胞值無差異。手術(shù)后第1天和第7天，VKH綜合征組房水細胞顯著高于對照組；而到術(shù)后第30天和90天，兩組房水細胞值無差異。
　　 3.2在VKH綜合征組和對照組外周血中都沒有檢測到IL-17的表達。手術(shù)后第1天，VKH綜合征患者外周血中IL-23顯著增高，術(shù)后一周內(nèi)下降迅速，隨后緩慢下降，直到術(shù)后90天恢復術(shù)前水平；而在對照組中，沒有發(fā)現(xiàn)手術(shù)前后外周血中IL-23的變化。更重要的是，術(shù)前及術(shù)后各

9、時期，VKH綜合征患者組外周血IL-23的濃度都顯著高于對照組；手術(shù)前，兩組外周血中均未檢測到IFN-γ表達。手術(shù)后第1天和第7天，VKH綜合征患者外周血中IFN-γ顯著增高，術(shù)后30天恢復術(shù)前水平；手術(shù)后第1天和第7天，VKH綜合征患者外周血中IL-27顯著增高，隨后緩慢下降，術(shù)后90天恢復術(shù)前水平；
　　 3.3兩組患者房水中均無IL-17、IL-23、IFN-γ和IL-27表達。
　　 3.4 rIL-23能夠促進

10、VKH綜合征患者外周血PBMC分泌IL-17，而rIL-27可以明顯抑制IL-17和IFN-γ的產(chǎn)生；
　　 3.5在VKH綜合征患者晶狀體囊膜和虹膜組織中發(fā)現(xiàn)IL-17R陽性表達；
　　 3.6 VKH綜合征患者外周血中IL-23水平與眼內(nèi)炎癥反應程度顯著相關(guān)。
　　 4.結(jié)論:
　　 VKH綜合征并發(fā)白內(nèi)障患者行超聲乳化白內(nèi)障吸除聯(lián)合人工晶體植入手術(shù)后Th17細胞及其相關(guān)因子表達增高，而且外周血IL-

11、23水平與眼內(nèi)炎癥反應關(guān)系密切。
　　 第二章、Th17細胞相關(guān)因子在Behcet病并發(fā)白內(nèi)障患者手術(shù)后炎癥反應中的作用
　　 1.目的:
　　 研究Th17細胞相關(guān)因子在Behcet病并發(fā)白內(nèi)障患者手術(shù)后眼內(nèi)炎癥反應中的作用。
　　 2.方法:
　　 2.1對7例(7只眼)Behcet病征并發(fā)的白內(nèi)障患者行超聲乳化聯(lián)合人工晶體植入手術(shù)。對照組同第一章；所有患者由同一術(shù)者行標準超聲乳化白內(nèi)障吸除聯(lián)

12、合人工晶體植入術(shù)；
　　 2.2應用激光蛋白細胞檢測儀定量檢測手術(shù)前后的前房蛋白濃度和細胞數(shù)量;
　　 2.3手術(shù)前和手術(shù)后第1、7、30、90天抽取患者外周靜脈血。手術(shù)過程中，留取房水、囊膜組織和部分Behcet病患者虹膜組織。外周血分離獲得單核細胞加入rIL-23或rIL-27培養(yǎng)后收集上清液；
　　 2.4采用ELISA方法檢測血清、培養(yǎng)上清和房水中IL-17、IL-23、IFN-γ和IL-27蛋白濃度。免

13、疫組化分析晶狀體前囊膜和虹膜組織中IL-17R表達；
　　 2.5采用SPSS10.0軟件分析所得數(shù)據(jù)，P值小于等于0.05是為具有統(tǒng)計學意義。
　　 3.結(jié)果:
　　 3.1 Behcet病房水閃輝值在各時段都高于對照組。手術(shù)前，Behcet病患者組雖然處于炎癥靜止期，但房水閃輝值依舊比對照組稍高；術(shù)后第1天，兩組值差異顯著；術(shù)后第7天和第30天依舊存在明顯差異。直到術(shù)后90天恢復術(shù)前水平。手術(shù)前，Behcet

14、病患者和對照組房水細胞值無差異。手術(shù)后第1天和第7天，Behcet病細胞顯著高于對照組；而到術(shù)后第30天和90天，兩組房水細胞值無差異。
　　 3.2在Behcet病和對照組外周血中都沒有檢測到IL-17的表達。手術(shù)后第1天，Behcet病患者外周血中IL-23顯著增高，術(shù)后一周內(nèi)下降迅速，隨后緩慢下降，直到術(shù)后90天恢復術(shù)前水平;而在對照組中，沒有發(fā)現(xiàn)手術(shù)前后外周血中IL-23的變化。更重要的是，術(shù)前及術(shù)后各時期，Behcet

15、病患者組外周血IL-23的濃度都顯著高于對照組；手術(shù)前，兩組外周血中均未檢測到IFN-γ表達。手術(shù)后第1天和第7天，Behcet病患者外周血中IFN-γ顯著增高，術(shù)后30天恢復術(shù)前水平;手術(shù)后第1天至第30天，Behcet病患者外周血中IL-27顯著增高，隨后緩慢下降，術(shù)后90天恢復術(shù)前水平；
　　 3.3兩組患者房水中均無IL-17、IL-23、IFN-γ和IL-27表達。
　　 3.4 rIL-23能夠促進Behce

16、t病患者外周血PBMC分泌IL-17，而rIL-27可以明顯抑制IL-17和IFN-γ的產(chǎn)生；
　　 3.5在Behcet病患者晶狀體囊膜和虹膜組織中發(fā)現(xiàn)IL-17R陽性表達；
　　 3.6 Behcet病患者外周血中IL-27和IFN-γ水平與眼內(nèi)炎癥反應程度顯著相關(guān)。
　　 4.結(jié)論:
　　 Behcet病并發(fā)白內(nèi)障患者行超聲乳化白內(nèi)障吸除聯(lián)合人工晶體植入手術(shù)后Th17細胞及其相關(guān)因子表達增高，而且外