全人源抗肝癌重組免疫毒素的構(gòu)建、表達(dá)及初步鑒定.pdf

1、南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文全人源抗肝癌重組免疫毒素的構(gòu)建、表達(dá)及初步鑒定姓名：王子露申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：病理學(xué)指導(dǎo)教師：馮振卿20050420南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論義全人源抗肝癌重組免疫毒素的構(gòu)建、表達(dá)及初步鑒定研究生：王子露導(dǎo)師：馮振卿教授中文摘要肝細(xì)胞肝癌在我國(guó)的發(fā)病率較高，且惡性程度高，是嚴(yán)重影響我國(guó)人民健康的惡性腫瘤之一。盡管近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)我國(guó)在肝癌的臨床治療方面積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)，基礎(chǔ)研究方面也取得長(zhǎng)足的進(jìn)步，但遠(yuǎn)未達(dá)到控制該

2、腫瘤的程度；肝癌對(duì)常規(guī)的放療、化療方法不敏感，近年來(lái)多傾向于以手術(shù)為主的綜合治療，但手術(shù)治療僅對(duì)部分早期患者適用，且術(shù)后一年生存率僅為397％，因此亟需利用現(xiàn)代生物技術(shù)探索新的治療方法。抗體技術(shù)及融合蛋白技術(shù)在腫瘤治療方面不斷取得進(jìn)展，但全人抗體與毒素融合蛋白治療肝癌的研究國(guó)內(nèi)還未見報(bào)道；因此，為了探討全人重組免疫毒素在肝癌的導(dǎo)向治療中的作用，本研究采用基因工程技術(shù)，將從全人源噬菌體ScFv抗體庫(kù)中篩選出的抗肝癌單鏈抗體基因與相思子毒素

3、A鏈基因重組，構(gòu)建原核表達(dá)載體pBAD／gIII。A3／AbrinA，探索其在大腸桿菌TOPl0中的誘導(dǎo)表達(dá)情況及表達(dá)條件。對(duì)誘導(dǎo)產(chǎn)物純化后，得到抗肝癌免疫毒素A3／Abrin—A，初步確定對(duì)人肝癌細(xì)胞系BEL7402的生長(zhǎng)抑制作用，從而制備出具有一定臨床應(yīng)用潛能的特異性全人源抗肝癌免疫毒素，為今后肝癌的臨床導(dǎo)向治療研究提供技術(shù)貯備。研究方法1根據(jù)本課題組從全人源噬菌體ScFv抗體庫(kù)中篩選出的抗肝癌單鏈抗體A3基因及GenBank已發(fā)表