亞健康通便涼茶的制劑工藝及藥效學(xué)研究.pdf

1、亞健康通便涼茶是南方醫(yī)科大學(xué)羅仁教授在對(duì)亞健康人群大樣本流行病學(xué)調(diào)查基礎(chǔ)上，結(jié)合中醫(yī)基礎(chǔ)理論和多年臨床經(jīng)驗(yàn)，針對(duì)亞健康人群便秘癥狀，設(shè)計(jì)開發(fā)的涼茶飲料。 亞健康人群便秘的發(fā)病率較高，各地區(qū)不同亞健康人群調(diào)查結(jié)果不同，其發(fā)生率為30%～50%。西醫(yī)對(duì)便秘的治療主要有膨松劑、滲透性通便劑、促動(dòng)力藥物及刺激性瀉藥，最近的研究表明前列腺素類藥物治療便秘也有效，但總體治療效果不佳，且副作用不可避免。中醫(yī)通過(guò)辨證論治，通常能取得較好療效，但

2、運(yùn)用藥物來(lái)干預(yù)便秘，在亞健康患者中難以接受。而飲用涼茶能及時(shí)補(bǔ)充液體且又是我國(guó)較為普遍接受的養(yǎng)生食療傳統(tǒng)習(xí)慣，因此具有較好的實(shí)用價(jià)值。 本論文通過(guò)對(duì)以便秘為主要證候的亞健康人群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，從而歸納便秘型亞健康人群的中醫(yī)證候分布特點(diǎn)，根據(jù)主要證候設(shè)計(jì)處方。在開發(fā)成涼茶飲料前對(duì)其有效性及制劑工藝進(jìn)行研究。根據(jù)《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序和檢驗(yàn)方法》中“通便功能檢驗(yàn)方法”的規(guī)定，進(jìn)行本涼茶的制劑工藝、藥效學(xué)研究，為亞健康通便涼茶的工

3、業(yè)生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。本研究主要包括流行病學(xué)調(diào)查、制劑工藝學(xué)研究、藥效學(xué)研究等三方面內(nèi)容。 第一部分亞健康便秘的流行病學(xué)研究 目的：通過(guò)對(duì)以便秘為主要證候的亞健康人群進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，分析便秘型亞健康的中醫(yī)證候分布，從而為亞健康便秘涼茶的組方提供科學(xué)依據(jù)。同時(shí)，分析其相關(guān)因素，以助于提供防治措施。 方法：應(yīng)用橫斷面研究方法，采用現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查方式，讓調(diào)查對(duì)象填寫亞健康調(diào)查問(wèn)卷，結(jié)合臨床檢查結(jié)果，判斷健康狀況（包括健康、亞

4、健康狀態(tài)、疾病）。同時(shí)通過(guò)醫(yī)師訪談采集調(diào)查對(duì)象的中醫(yī)四診信息資料，按有關(guān)中醫(yī)證候的辨證標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行辨證。然后，將上述合格的調(diào)查問(wèn)卷經(jīng)信息處理后錄入Epidata3．20數(shù)據(jù)庫(kù)，應(yīng)用SPSS13．0軟件進(jìn)行描述性分析，以研究便秘型亞健康狀態(tài)的發(fā)病率、中醫(yī)證候分布、相關(guān)因素分析。 結(jié)果：1、共調(diào)查6110名企業(yè)醫(yī)科高校等特定人群，有3981人處于亞健康狀態(tài)，現(xiàn)患率為65．1%，其中以便秘為主要臨床表現(xiàn)的占亞健康人群34．9%。

5、2、本次調(diào)查分析結(jié)果顯示，便秘型亞健康的中醫(yī)證型主要表現(xiàn)為陰虛、氣滯、氣虛，以虛證為本，實(shí)證為標(biāo)。 3、腹脹、飲食衛(wèi)生、壓抑、食量減少、脫發(fā)、記憶力減退、失眠等7個(gè)因素與亞健康便秘關(guān)系密切。 第二部分亞健康通便涼茶的制劑工藝研究 目的：觀察水提醇沉法、ZTC1+1-Ⅱ天然澄清劑法對(duì)亞健康通便涼茶的不同處理效果，尋找最佳工藝，為亞健康通便涼茶的工業(yè)生產(chǎn)提供科學(xué)依據(jù)。 方法：將亞健康通便涼茶處方藥材，加入10

6、倍量水，煎煮2次，每次2小時(shí)，合并濾液，將濾液濃度調(diào)至至1：30（原藥：提取液）。水提醇沉法采用95%乙醇加入提取液，將提取液乙醇濃度調(diào)至90%，靜置12小時(shí)后，虹吸、抽濾上清液，并在60℃左右，用回旋蒸發(fā)皿回收乙醇后，取上清液；ZTC1+1-Ⅱ天然澄清劑法：按產(chǎn)品要求配置A、B組分，將6%提取液體積的B組分溶液緩慢細(xì)流加入提取液中，攪勻，再將8%提取液體積的A組分緩慢細(xì)流加入提取液中，攪勻，置60～70℃水浴中保溫1h，然后常溫靜置2

7、4h，粗濾后離心，取上清液。上述三種方法均加純凈水至原藥：提取液為1：30（重量比）。經(jīng)上述提取液高溫殺毒后，靜置在無(wú)菌透明的玻璃器皿中，常溫靜置6個(gè)月，肉眼觀察上述提取液的色澤、澄清度、有無(wú)顆粒掛壁情況。上述2種方法所得提取液進(jìn)行總黃酮測(cè)定。 結(jié)果：ZTC1+1-Ⅱ天然澄清劑法在保留涼茶有效成分和維持其穩(wěn)定性方面，與水提醇沉法有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（總黃酮含量t=5．701，P=0．000；沉淀量t=-17．651，P=0．000）。其

8、最佳工藝條件為A1B2C2，即澄清劑用量：A組分8%，B組分6%，中藥提取液濃度為1：30，溫度為60℃時(shí)反應(yīng)30分鐘。 第三部分亞健康通便涼茶的藥效學(xué)研究 目的：觀察亞健康通便涼茶對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)功能和排便情況的影響，明確亞健康通便涼茶的通便效果。 方法：SPF級(jí)昆明種雄性小鼠120只，體重為18～22g，亞健康通便涼茶給藥設(shè)低、中、高三個(gè)劑量組，劑量分別是1200、2400、3600mg/kg．BW（分別相當(dāng)于

9、人體最小推薦量的10、20、30倍），同時(shí)設(shè)便秘模型對(duì)照組和正常組。每組12只動(dòng)物。 1、小腸運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)：各劑量組按1200、2400、3600mg/kg．BW（均調(diào)至相同體積）經(jīng)口給予亞健康通便涼茶，兩個(gè)對(duì)照組給予等體積的蒸餾水，每天1次，連續(xù)給亞健康通便涼茶7天。末次給樣的當(dāng)天晚上各組動(dòng)物禁食（飲水不限），16小時(shí)后模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組給予劑量為2mg/kg．BW的復(fù)方地芬諾酯溶液（0．2ml/10g．BW），正常組給予蒸餾

10、水。30分鐘后，3個(gè)劑量組給予含亞健康通便涼茶的墨汁（含5%的活性炭粉、10%阿拉伯樹膠），模型對(duì)照組和正常組給予墨汁。給予墨汁25分鐘后頸椎脫臼處死動(dòng)物，打開腹腔分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線進(jìn)行測(cè)量。腸管長(zhǎng)度為“小腸總長(zhǎng)度”，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度”。按下列公式計(jì)算墨汁推進(jìn)率（P），并進(jìn)行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換（X）后再統(tǒng)計(jì)分析。墨汁推進(jìn)率（p）=墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度/小腸總長(zhǎng)度；X＝sin-1√

11、P 2、排便時(shí)間、糞便粒數(shù)和糞便重量的測(cè)定：各劑量組按1200、2400、3600mg/kg．BW（均調(diào)至相同體積）經(jīng)口給予亞健康通便涼茶，兩個(gè)對(duì)照組給予等體積的蒸餾水，每天1次，連續(xù)給藥7天。末次給樣的當(dāng)天晚上各組動(dòng)物禁食（飲水不限），16小時(shí)后模型對(duì)照組和3個(gè)劑量組給予劑量為10mg/kg．BW劑量的復(fù)方地芬諾酯（0．2ml/10g．BW），正常組給予等量的蒸餾水。給復(fù)方地芬諾酯后30分鐘，模型對(duì)照組和正常組小鼠給予墨汁灌胃

12、，3個(gè)劑量組給予含相應(yīng)亞健康通便涼茶的墨汁，同時(shí)開始計(jì)時(shí)。每只動(dòng)物均單獨(dú)飼養(yǎng)，并供給飼料和飲水，觀察記錄每只動(dòng)物首次排黑便時(shí)間、5小時(shí)內(nèi)排便粒數(shù)及重量。 3、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS13．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行完全隨機(jī)設(shè)計(jì)資料的方差分析（one-wayANOVA）統(tǒng)計(jì)處理。 結(jié)果：1、亞健康通便涼茶對(duì)動(dòng)物的一般情況和體重的影響。各組動(dòng)物的飲食和活動(dòng)正常，劑量組小鼠的糞便比對(duì)照組的軟且未出現(xiàn)稀便。劑量組小鼠在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)體重與正常組及模型

13、對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明其對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)無(wú)影響作用。 2、亞健康通便涼茶對(duì)小鼠小腸運(yùn)動(dòng)的影響。便秘模型對(duì)照組與正常組的墨汁推進(jìn)率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，表示便秘模型成立。經(jīng)數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換后統(tǒng)計(jì)分析，本涼茶高、中、低劑量組與便秘模型對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、亞健康通便涼茶對(duì)小鼠排便時(shí)間、糞便粒數(shù)和糞便重量的影響。各劑量組的首便時(shí)間比便秘模型對(duì)照組的縮短，高、中、低劑量組與其相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；高、中、低劑量組糞便粒數(shù)均

14、大于便秘模型對(duì)照組，且與便秘模型對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；高、中、低劑量組的糞便重量大于便秘模型對(duì)照組，且與便秘模型對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：1、便秘在亞健康人群中發(fā)病率較高，其中醫(yī)證候分布較散，證候主要集中在陰虛、氣滯、氣虛，以虛證為本，實(shí)證為標(biāo)。 2、根據(jù)流行病學(xué)調(diào)查及藥效學(xué)試驗(yàn)，亞健康通便涼茶在促進(jìn)小腸運(yùn)動(dòng)與改善小鼠便秘情況作用明確。 3、不同的制劑工藝對(duì)亞健康通便涼茶的性狀、穩(wěn)定性、澄清度有不同影