端粒酶抑制劑作用人肝癌、鼻咽癌細胞株后共同差異基因轉錄水平變化的研究.pdf

1、本研究目的：端粒酶抑制劑ASODN、SODN和EGCG分別作用肝癌細胞株SMMC-7721和鼻咽癌細胞株CNE2后，運用熒光定量PCR檢測基因表達譜芯片篩選出的六種基因的轉錄水平，探討調(diào)節(jié)端粒酶活性的共同分子靶點。 方法：1、在前期研究中利用基因表達譜芯片檢測端粒酶抑制劑作用于兩種癌細胞株后基因表達譜的變化，從基因表達譜芯片已篩選出的抑制劑作用前后共同變化的差異基因中，選擇出6種上調(diào)或下調(diào)顯著的基因，合成引物。2、培養(yǎng)SMMC-

2、772l和CNE2至對數(shù)生長期，以EGCG、ASODN和SODN的最佳濃度作用于細胞作為處理組，同時以不加藥物的細胞作為對照組，同時提取兩組細胞RNA，逆轉錄合成cDNA。3運用熒光定量PCR測定6種待測基因的轉錄水平，即mRNA的相對含量，結果與芯片所篩選出的基因表達譜的變化水平進行比較。 結果：1、EGCG、ASODN和SODN三種端粒酶抑制劑作用SMMC-7721后待測基因轉錄水平的變化，及其與基因表達譜變化的比較

3、： 1.1 三種藥物作用后KLHL24和BTG1基因的轉錄水平相對略低于對照組，這與其基因表達譜顯著上調(diào)的結果相反。 1.2 EGCG、SODN作用后DIO2和ID3基因的轉錄水平相對略低于對照組，這與其基因表達譜表達顯著下調(diào)結果相似；而ASODN作用后DIO2和ID3基因的轉錄水平相對略高于對照組的，這與其基因表達譜顯著下調(diào)相反。 2、EGCG、ASODN和SODN三種端粒酶抑制劑作用CNE2后待測基因轉錄水

4、平與基因表達譜變化比較： 2.1 三種藥物作用后KRT34基因的轉錄水平顯著高于對照組，這與其基因表達譜顯著上調(diào)結果相似。 2.2三種藥物作用后CA5B基因的轉錄水平顯著低于對照組，這與基因表達譜顯著下調(diào)結果相似。 結論：1 EGCG、ASODN和SODN三種端粒酶抑制劑作用SMMC-7721，熒光定量PCR檢測KLHL24、BTG1、DIO2和ID3基因轉錄水平的變化，沒有發(fā)現(xiàn)其共同上調(diào)或共同下調(diào)的一致變化；