腫瘤靶向的肝素-喜樹堿復(fù)合物的合成及其細(xì)胞毒性研究.pdf

1、喜樹堿是從植物中提取出來的一種具有廣譜抗腫瘤活性的生物堿。但是由于它的水溶性非常差，制備理想的制劑比較困難；缺乏選擇性殺死腫瘤細(xì)胞的能力，產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用；加上它的活性內(nèi)酯環(huán)結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，在生理pH條件下容易開環(huán)失活。這些缺陷極大地限制了它在臨床中的應(yīng)用。針對(duì)這些問題，本文以動(dòng)物體內(nèi)的一種水溶性聚多糖—肝素為載體，結(jié)合葉酸的腫瘤靶向功能，開展了以下三個(gè)方面的工作： 1、葉酸-肝素復(fù)合物的制備及其靶向細(xì)胞識(shí)別作用研究。以乙二胺作為

2、連接臂，通過兩次碳二亞胺反應(yīng)，將葉酸和肝素連接起來，合成了葉酸-肝素復(fù)合物。異硫氰酸熒光素進(jìn)行熒光標(biāo)記后的葉酸-肝素復(fù)合物與細(xì)胞的培育實(shí)驗(yàn)顯示，葉酸-肝素復(fù)合物對(duì)表面葉酸受體過度表達(dá)的腫瘤細(xì)胞仍然保留著特異性的識(shí)別能力。該葉酸-肝素復(fù)合物有望作為一種藥物載體，來實(shí)現(xiàn)抗腫瘤藥物的靶向輸送。 2、肝素-喜樹堿復(fù)合物的合成及其細(xì)胞毒性研究。利用一個(gè)甘氨酸小分子臂，在喜樹堿20位羥基處將喜樹堿和肝素共價(jià)連接起來，合成了一種水溶性肝素-喜

3、樹堿復(fù)合物（Hep-CPT）。高效液相色譜法測(cè)得它的載藥量為7.2％。Hep-CPT在pH 7.4的緩沖溶液中，37℃下經(jīng)過24小時(shí)只有不超過15％的喜樹堿釋放出來。隨著Hep-CPT所處緩沖溶液的pH從7.4下降到5.0，喜樹堿釋放速率顯著降低。與游離喜樹堿相比，喜樹堿形成Hep-CPT后對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞和人舌鱗癌Tca8113細(xì)胞的毒性下降了50％以上。通過喜樹堿的20位羥基與肝素成酯生成肝素-喜樹堿復(fù)合物，不但提高了喜樹堿在

4、水中的溶解度，而且可以增強(qiáng)其活性內(nèi)酯環(huán)的穩(wěn)定性。肝素-喜樹堿復(fù)合物有望通過大分子的通透性增強(qiáng)與滯留（enhanced permeability and retention，EPR）效應(yīng)，提高喜樹堿在腫瘤組織內(nèi)的分布，起到提高療效，降低毒副作用的目的。 3、葉酸偶聯(lián)的肝素-喜樹堿復(fù)合物的合成及其細(xì)胞毒性研究。以乙二胺作為連接臂，通過酰胺鍵將氨基化的葉酸與肝素-喜樹堿復(fù)合物連接起來，制備了一種葉酸偶聯(lián)的肝素-喜樹堿復(fù)合物（FA-He