輻射誘發(fā)的K562細(xì)胞增殖抑制、凋亡和Egr-1基因表達(dá)的研究.pdf

1、該課題以人紅白血病細(xì)胞K562為靶細(xì)胞,觀察了<'60>Coγ射線(xiàn)所致的腫瘤細(xì)胞增殖抑制、分化和凋亡情況,同時(shí)分析了照后早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因Egr-1的轉(zhuǎn)錄水平的變化.初步探討了<'60>Coγ射線(xiàn)誘發(fā)的k562細(xì)胞增殖抑制的可能的內(nèi)在機(jī)制.(1)應(yīng)用不同受照劑量的細(xì)胞增殖曲線(xiàn)和<'3>H-TdR摻入法測(cè)定增殖抑制率來(lái)觀察K562細(xì)胞對(duì)<'60>Coγ射線(xiàn)的敏感程度.結(jié)果發(fā)現(xiàn),細(xì)胞增殖抑制的發(fā)生具有一定的時(shí)間性,且表現(xiàn)出明顯的劑量信賴(lài)性(p

2、<0.01).對(duì)細(xì)胞的Giemsa染色發(fā)現(xiàn),照射前后k562細(xì)胞的形態(tài)和染色特點(diǎn)發(fā)生了明顯的變化,具備了某些較高分化程度紅細(xì)胞的特點(diǎn).對(duì)k562細(xì)胞平均細(xì)胞內(nèi)總蛋白的測(cè)定結(jié)果表明,照后數(shù)天內(nèi)照射組的平均細(xì)胞內(nèi)總蛋白明顯高于對(duì)照組.現(xiàn)有的文獻(xiàn)表明照后細(xì)胞內(nèi)總蛋白升高中k562細(xì)胞發(fā)生分化的一個(gè)重要特點(diǎn).(2)應(yīng)用基于線(xiàn)粒體膜電位變化而表征細(xì)胞凋亡的試劑盒測(cè)定了不同劑量所致的凋亡和受照后不同時(shí)間的細(xì)胞凋亡變化.結(jié)果發(fā)現(xiàn),在觀察的劑量和樣本范

3、圍內(nèi),受照劑量大小與凋亡細(xì)胞的比例未見(jiàn)有差別,而照后6h處凋亡細(xì)胞比例較高.(3)應(yīng)用RT-PCR法擴(kuò)增了Egr-1基因編碼區(qū)的一個(gè)片段,以此來(lái)觀察這個(gè)與細(xì)胞分化和凋亡密切相關(guān)的基因的轉(zhuǎn)錄水平變化.結(jié)果發(fā)現(xiàn),在照后的0.5h到1h,Egr-1的轉(zhuǎn)錄水平迅速升至最高,此后迅速下降,到8h下降到低于正常水平.研究結(jié)果表明,<'60>Coγ射線(xiàn)誘導(dǎo)的K562細(xì)胞增殖抑制表現(xiàn)出劑量依賴(lài)性的特點(diǎn),<'60>Coγ射線(xiàn)所致的k562細(xì)胞增殖抑制可能