IL-18基因修飾肝細胞經(jīng)脾移植治療轉(zhuǎn)移性肝癌的實驗研究.pdf

1、浙江大學碩士學位論文IL-18基因修飾肝細胞經(jīng)脾移植治療轉(zhuǎn)移性肝癌的實驗研究姓名：冷建杭申請學位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(傳染病)指導教師：張立煌2000.5.1浙江大學醫(yī)學院碩士論文f 將m l L ．1 8 重組腺病毒轉(zhuǎn)染至小鼠胚胎肝細胞( B N L ．C L 2 ) ，每隔2 小時收集培養(yǎng)上清，采用E L I S A 方法檢測培養(yǎng)上清中I L - 1 8 水平i 利用C 2 6 結(jié)腸腺瘤細胞建立小鼠轉(zhuǎn)移性肝癌模型。繼將轉(zhuǎn)染r a

2、i L - 1 8 重組腺病毒的胎肝細胞( B N L ．I L ．1 8 ) 脾內(nèi)移植荷瘤小鼠，另設(shè)病毒對照組( B N L ．L a c Z ) 和細胞對照組( B N L ．C L 2 ) 。二周后檢測血清I L ．1 8 、l F N ．丫、腫瘤壞死因子- a ( T N F - a ) 和一氧化氨( N o ) 分泌水平：檢測脾臟的C T L 活性；分析肝組織腫瘤體積及組織病理變化并用圖像分析儀M I P S 作腫瘤面積半定量

3、分析：觀察荷瘤小鼠的存活期。實驗結(jié)果表明，I L - 1 8 基因修飾肝細胞的培養(yǎng)上清及其脾內(nèi)移植后荷瘤小鼠血清中的I L 一1 8 水平明顯升高，提示腺病毒能有效地將I L - 1 8 基因轉(zhuǎn)染至肝細胞并使之在體外、體內(nèi)有效表達；I L - 1 8 基因修飾肝細胞脾內(nèi)移植后荷瘤小鼠血清I F N - y 、T N F 一取和N O 水平明顯升高，脾臟的C T L 活性顯著增強，同時可見腫瘤體積、面積百分比縮小，肝組織中有較多的淋巴細胞