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文檔簡介
1、目的:觀察同種異體骨髓來源的血管內(nèi)皮祖細胞移植治療實驗性Wistar大鼠下肢動脈硬化閉塞癥的可行性與療效。
方法:選取24只雄性Wistar大鼠,分別結(jié)扎并離斷雙側(cè)股動脈的分支,雙側(cè)股動脈予有齒鑷沿股動脈走形鉗夾約30s,并予高脂飼料常規(guī)喂養(yǎng),下肢肌注維生素D330萬u/kg,每月一次。建立實驗性股動脈硬化閉塞大鼠模型。分離純化雄性Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞,體外培養(yǎng),VEGF、EGF、bFGF、IGF-1多種生長因
2、子聯(lián)合誘導分化成血管內(nèi)皮祖細胞后,用5一溴脫氧尿嘧啶(BrdU)標記；12只實驗性雙股動脈硬化閉塞大鼠右側(cè)后肢移植BrdU標記的血管內(nèi)皮祖細胞(B組)；同體左側(cè)相同部位注射生理鹽水作為對照(A組)。分別于移植后第14天和第28天處死動物取雙下肢肌肉組織,行免疫組織化學(FV111、BrdU)檢測。
結(jié)果:移植后14天B1組平均每中倍視野FV111染色陽性的毛細血管數(shù)多于A1組,分別為B1:4.556±0.506個和A1:2
3、.867±0.915個(P<0.05)；移植后28天B2組平均每中倍視野FV111染色陽性的毛細血管數(shù)日顯著多于A2組,分別為B2:5.941±1.324個和A2:3.000±0.707個(P<0.05)。BrdU免疫組化染色發(fā)現(xiàn)B組肌束間有血管內(nèi)皮細胞呈現(xiàn)Brdu陽性染色,而A組無一例呈現(xiàn)Brdu陽性染色。
結(jié)論:成功制備了同一活體雙下肢實驗性股動脈硬化閉塞大鼠模型。分別用同種異體大鼠MSCs體外培養(yǎng)并誘導分化而來的血管
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