血管內(nèi)皮祖細(xì)胞移植治療動(dòng)脈硬化閉塞的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:觀察同種異體骨髓來(lái)源的血管內(nèi)皮祖細(xì)胞移植治療實(shí)驗(yàn)性Wistar大鼠下肢動(dòng)脈硬化閉塞癥的可行性與療效。
　　 方法:選取24只雄性Wistar大鼠,分別結(jié)扎并離斷雙側(cè)股動(dòng)脈的分支,雙側(cè)股動(dòng)脈予有齒鑷沿股動(dòng)脈走形鉗夾約30s,并予高脂飼料常規(guī)喂養(yǎng),下肢肌注維生素D330萬(wàn)u/kg,每月一次。建立實(shí)驗(yàn)性股動(dòng)脈硬化閉塞大鼠模型。分離純化雄性Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,體外培養(yǎng),VEGF、EGF、bFGF、IGF-1多種生長(zhǎng)因

2、子聯(lián)合誘導(dǎo)分化成血管內(nèi)皮祖細(xì)胞后,用5一溴脫氧尿嘧啶(BrdU)標(biāo)記；12只實(shí)驗(yàn)性雙股動(dòng)脈硬化閉塞大鼠右側(cè)后肢移植BrdU標(biāo)記的血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(B組)；同體左側(cè)相同部位注射生理鹽水作為對(duì)照(A組)。分別于移植后第14天和第28天處死動(dòng)物取雙下肢肌肉組織,行免疫組織化學(xué)(FV111、BrdU)檢測(cè)。
　　 結(jié)果:移植后14天B1組平均每中倍視野FV111染色陽(yáng)性的毛細(xì)血管數(shù)多于A1組,分別為B1:4.556±0.506個(gè)和A1:2

3、.867±0.915個(gè)(P<0.05)；移植后28天B2組平均每中倍視野FV111染色陽(yáng)性的毛細(xì)血管數(shù)日顯著多于A2組,分別為B2:5.941±1.324個(gè)和A2:3.000±0.707個(gè)(P<0.05)。BrdU免疫組化染色發(fā)現(xiàn)B組肌束間有血管內(nèi)皮細(xì)胞呈現(xiàn)Brdu陽(yáng)性染色,而A組無(wú)一例呈現(xiàn)Brdu陽(yáng)性染色。
　　 結(jié)論:成功制備了同一活體雙下肢實(shí)驗(yàn)性股動(dòng)脈硬化閉塞大鼠模型。分別用同種異體大鼠MSCs體外培養(yǎng)并誘導(dǎo)分化而來(lái)的血管