自體血管內皮祖細胞移植治療腦缺血患者的初步研究.pdf

1、[研究背景] 腦血管疾病是非常嚴重的健康和社會問題，具有發(fā)病率高、致殘率高、死亡率高、復發(fā)率高，以及醫(yī)療花費比例高等特點，給家庭和社會造成了沉重的負擔。腦梗死是腦血管疾病中最常見的類型，約占全部腦血管疾病的70％。迄今為止，臨床上只有一種對因治療的藥物即重組組織型纖溶酶原激活劑獲得了食品及藥物管理局(FDA)的批準用于急性腦缺血的治療，但因治療時間窗的嚴格限制只有極少比例的患者能夠獲得該治療。隨著細胞工程的推進，干細胞移植為腦缺血的治療

2、打開了一扇新奇之門。其中，血管內皮祖細胞是備受關注的一類成體干細胞，在生理或病理因素刺激下。內皮祖細胞可從骨髓向靶部位動員、增殖、分化，參與損傷血管的修復，為神經發(fā)生提供富含血管的微環(huán)境。目前，全世界已有大量的動物實驗針對血管內皮祖細胞(EPCs)移植治療腦梗死進行了細致、深入的研究，證實EPCs移植治療腦梗死是安全的、有效的。遺憾的是，以EPCs移植治療腦梗死的臨床研究國內外尚未見報。陳鎮(zhèn)洲博士先后將3×107和3×106的EPCs移

3、植入兔和鼠的大腦中動脈閉塞模型，均未見不良反應，且利于血管和神經修復。在此基礎上，初次開展自體血管內皮祖細胞移植治療腦梗死患者的臨床Ⅰ期試驗。
　　 [目的] 觀察自體血管內皮祖細胞移植治療腦梗死患者的安全性。
　　 [方法] 征集符合納入及排除標準的志愿者，簽署知情同意書，遵循患者意愿將其分配到移植組或對照組。所有受試患者均給予規(guī)范的腦梗死治療方案及神經康復治療。同時記錄以下資料，即人口統(tǒng)計學資料、病情和診斷記錄、過敏

4、史、既往史及危險因素、實驗室檢查和輔助檢查結果等，以完全掌握患者的臨床資料利于細胞移植后的安全性分析。
　　 移植組患者行髂后上棘骨髓穿刺獲取骨髓細胞，密度梯度離心法獲取骨髓單個核細胞。將骨髓單個核細胞接種于纖連蛋白(Fn)包被的塑料培養(yǎng)瓶，以“EC basal medium-2(EBM-2)+EGM-2 MV SingleQuots”培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，流式細胞儀檢測細胞表面標志物。所有細胞移植前均進行嚴格的質量控制，以保證細胞移

5、植的質量。細胞擴增到足夠數(shù)量后，按2.5×106/Kg體重，混懸于含5％自體血清的生理鹽水100ml中，外周靜脈移植;3天后行第二次移植，移植量同第一次（即總共移植5×106/Kg體重）。
　　 移植組和對照組患者均于移植后4個月/8個月/12個月進行神經功能評分，定期進行實驗室檢查和輔助檢查。記錄隨訪期的治療情況、不良反應及并發(fā)癥等。
　　 [結果]移植組入選2人，對照組入選4人;受試人員的各項資料均認真填寫于病例報告

6、表中。成功分離EPCs，并進行體外培養(yǎng)、擴增及鑒定;細胞擴增到足夠數(shù)量后行靜脈移植。
　　 與對照組相比，移植組患者在隨訪1年內未見與細胞移植有關的任何不良反應及并發(fā)癥，且無其他疾病住院史。移植組患者神經功能及日常生活活動能力逐漸改善，患者Ⅰ回歸社會，患者Ⅱ回歸社區(qū);較對照組相比，預后較理想，但因研究對象較少暫無法行統(tǒng)計學分析。
　　 [結論]體外提取、培養(yǎng)及擴增自體血管內皮祖細胞，行外周靜脈移植治療腦梗死患者是安全的。