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1、目的:從土荊芥中提取出總黃酮類化合物,觀察其對體外人類乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖的影響;并初步探討其抑制MCF-7細(xì)胞增殖的可能機制,為土荊芥作為抗癌藥物的開發(fā)和利用提供科學(xué)依據(jù)。
方法:超聲波法提取土荊芥總黃酮類化合物,并采用了高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法技術(shù)對其中槲皮素和山柰酚含量進(jìn)行了測定;采用了MTT法檢測不同濃度的土荊芥總黃酮類化合物、槲皮素、山柰酚在不同培養(yǎng)時長下(12h、24h及48h)對體外培養(yǎng)的MCF-7細(xì)胞生長的影
2、響;Hoechst染色、DNA凝膠電泳檢測土荊芥總黃酮類化合物對MCF-7細(xì)胞凋亡的影響;流式細(xì)胞術(shù)的細(xì)胞周期分析檢測土荊芥總黃酮類化合物對MCF-7細(xì)胞細(xì)胞周期的影響;檢測處理后MCF-7細(xì)胞中MDA的含量、SOD酶及CAT酶的活力來探討土荊芥總黃酮類化合物對MCF-7細(xì)胞的氧化損傷作用。
結(jié)果:超聲波法提取土荊芥總黃酮類化合物得率為10.19%,提取物中槲皮素和山柰酚含量分別為0.542~0.501PPM和1.192~1.
3、187PPM;不同濃度的土荊芥總黃酮類化合物在處理時間為12h、24h及48h,對MCF-7細(xì)胞活性均有抑制作用,且抑制作用具有劑量依賴性,隨著培養(yǎng)時間的延長其抑制作用會隨之增強;然而槲皮素在對應(yīng)濃度下對MCF-7細(xì)胞活性未觀察到顯著抑制作用,山柰酚則只在12h處理組下對MCF-7細(xì)胞活性有一定抑制作用;觀察到Hoechest染色土荊芥總黃酮類化合物少量誘導(dǎo)MCF-7細(xì)胞出現(xiàn)凋亡小體,DNA凝膠電泳中未觀察到明顯的梯形條帶;流式細(xì)胞術(shù)檢
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