MDR1基因表達與調控的研究.pdf

1、目的：①探討漢族人群中多藥耐藥基因l(multidrug resistance gene1,MDR1)C3435T位點多態(tài)性對外周血單個核細胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中mRNA表達的影響。②通過研究苯巴比妥(phenobarbitone,PB)對PBMCs MDR1表達的影響,了解PBMCsMDR1的表達是否也能被誘導,并研究了PBMCs中MDR1與孕烷X受體(pregnane

2、X receptor,PXR)表達的關系,初步探討其意義。
　　 方法：①以163名(男性98名,女性65名)無親緣關系的中國健康漢族兒童的外周血標本為研究對象,采用PCR-RFLP技術檢測其MDRl基因C3435T位點的基因型,實時熒光定量PCR法檢測其PBMCs MDR1 mRNA表達水平。②將36名健康兒童的PBMCs分離后,將其分編為無培養(yǎng)組(不進行培養(yǎng)和藥物處理)、自然培養(yǎng)組(只單純培養(yǎng)不進行藥物處理)及PB培養(yǎng)組(加

3、入終濃度為40μm/L:兒苯巴比妥處理)。將自然培養(yǎng)組與PB培養(yǎng)組培養(yǎng)24h后,實時熒光定量PCR檢測這三組細胞的MDR1及PXR mRNA表達水平。③Hardy-Wemberg檢驗采用卡方檢驗。不同分組間的PBMCs MDR1或PXR表達水平的比較采用t檢驗或單因素方差分析,MDR1及PXR的表達水平相關性分析使用Spearman法。P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結果：①在163名健康中國漢族兒童中,63名為野生型

4、純合子3435CC型,78名為雜合子CT型,22名為突變型純合子TT型,CC、CT與TT各基因型的發(fā)生頻率分別為38.7％、47.9％與13.5％；其C等位基因頻率為62.6％,T等位基因頻率為37.4％；C3435T多態(tài)性位點的基因型頻率分布符合Uardy-Weinberg平衡(P>0.05)；CC、CT和TT各基因型組間PBMCs MDR1 mRNA表達水平分別為(4.562±3.383)x10-3、(4.6734±3.710)×1

5、0-3和(4.489±2.928)x10-3,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。②未培養(yǎng)組、自發(fā)培養(yǎng)組和PB培養(yǎng)組MDR1mRNA表達水平分別為(4.475±2.980)×10-3、(4.991±4.165)×10-3及(7.265±5.067)x10-3,PXR mRNA在以上三組中的表達水平分別為(2.073±1.335)x10-3、(1.836±1.467)×10-3及(3.014±2.238)×10-3。PB培養(yǎng)組MDRl和PX

6、R表達水平均高于未培養(yǎng)組和自發(fā)培養(yǎng)組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),而未培養(yǎng)組和自發(fā)培養(yǎng)組之間的MDR1和PXR表達水平差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)；相關性分析提示,苯巴比妥處理后MDRl及PXR mRNA的表達水平呈正相關關系(γ=O.517,P=0.0012)。
　　 結論：①漢族人群中MDR1基因C3435T多態(tài)性對PBMCs mRNA表達并沒有顯著性影響,對于漢族兒童C3435T位點多態(tài)性不能作為推測MDR1表達