實時熒光定量PCR檢測白血病MDR1及WT1基因表達.pdf

1、v9 7 ‘7 6 9- L訃樊5 JU D C晰級編q第一軍醫(yī)大學碩士學位論文實時熒光定量P C R 檢測白血病M D R l 及W T ] 基因表達R e a l - t i m ef l u o r e s c e n tq u a n t i t a t i v eP C R f o rd e t e c t i o nM D R I a n d Ⅵ廠r 1g e n e e x p r e s s i o ni nl e u

2、k e m i a s李琳指導擻師姓名徐兵教授主任睦師單位名稱覆地址笙二：里墮盔蘭—[ 型1 ．! 衛(wèi)塑箜! 墮! 塾一一 專 業(yè) 名 稱I c Ⅱ液學論文提交E l論文答辯日期2 0 ( ) 6 ，{ ：5 ，』期2 0 0 6 f I i 6 』J學位授予單位和日期答辯委員叁主席論文評闐人筇·軍醫(yī)九學2 0 0 6 年6 月川淑茁教攫證1 E 睡【| 『1 j扯欣教授主任聯(lián)師劉曉力教授主任醫(yī)師2 0 0 6 年6 門6 |

3、 |中文摘要熒光定量P C R 方法定量檢測w T I 和M D R l 基因的表達水平，并分析其與性別，疾病分型、C D 3 4 抗原表達與否、臨床特征及療效和預后關系。追蹤部分病例，觀察不同病程中w T l 和M D R l 基因表達量的變化。5 ．多個獨立樣本的比較采用K r u s k a l —W a l l i sT e s t 非參數(shù)檢驗方法，2 組比較之間采用兩獨立樣本t 檢驗，；多變量間相關分析采用偏相關分析( P a

4、 r t i a lC o r r e l a t i o na n a l y s i s ) ；所有檢驗以P 曼0 ．0 5 認為有顯著差異。結(jié)果1 、所構(gòu)建實時熒光定量P C R 檢測w T l 和M D R l m R N A 方法的循環(huán)閾值( c T )與該模板的起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在良好的線性關系，敏感度達l ×1 0 2 拷貝數(shù)／m l ，且重復性好，管間和批間的變異系數(shù)均小于1 0 ％2 、急性髓性白血病( A

5、M L ) 和急性淋巴細胞白血病( A L L ) 患者之間w T l基因和M D R l 基因的表達水平均無顯著性差異，但與對照組相比，P d V I L 和A L L患者w T l 基因和M D R l 基因表達水平均顯著升高。慢性髓性白血病( C M L )急變期w T l 基因和M D R l 基因表達水平均明顯高于慢性期。在所有急性白血病患者中，M D R l 與w T l 表達呈現(xiàn)相關性( 仁O ．4 4 7 ，P = 0

6、．0 0 4 ) 。3 、M D R l 與w T l 表達量與急性白血病發(fā)病時患者性別、外周血白細胞計數(shù)、血紅蛋白、血小板及C D 3 4 抗原是否表達之間無明顯相關關系。4 、A M L 和A L L 患者中w T l 和M D R l 基因高表達的C R 率均高于w T l 和M D R l 基因低表達的患者，但統(tǒng)計學分析差異無顯著性( p > o ．0 5 ) 。A M L 和A L L患者W T l 和M D R l 基

7、因共同高表達組C R 率顯著高于共同低表達組( p < o ．0 5 ) 。5 、白血病緩解期W T l 基因表達水平顯著低于初治時( p - o ．0 3 2 ) ，緩解后M D R l 基因表達水平也較初治時下降，但未達到統(tǒng)計學差異。6 、5 例長期隨訪患者可見M D R l 和w T l 持續(xù)高表達或下降后又上升的患者呈現(xiàn)復發(fā)及難治。結(jié)論1 、我們所建立的w T l 和M D R l 基因的熒光定量P C R 檢測方法在單獨