不同途徑和時(shí)段輸注BMMSC對臍血CIK-NK細(xì)胞在荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)的影響.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文不同途徑和時(shí)段輸注BMMSC對臍血CIK/NK細(xì)胞在荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)的影響姓名：王瀟娉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：兒科學(xué)指導(dǎo)教師：黎陽20090520中山大學(xué) 不同途徑和時(shí)段輸注B M M S C 對臍血C I K ／N K 細(xì)胞在荷瘤小鼠體內(nèi)抗腫瘤效應(yīng)的影響在放療、化療或H S C T 后間隔2 “ - - 4 周。雖然B M M S C 和C I K ／N K 等免疫效應(yīng)細(xì)胞使用時(shí)間并不重疊，但是如果體內(nèi)長期存

2、活的B M M S C 可以抑制后期輸入的C I K ／N K細(xì)胞的抗腫瘤效應(yīng)，削弱其過繼細(xì)胞免疫治療的療效，將對惡性血液病患者的預(yù)后十分不利。如何制定達(dá)到最佳促進(jìn)植入及G V L 效應(yīng)的B 刪S C 及C I K ／N K 細(xì)胞共同移植策略仍需深入探討。本實(shí)驗(yàn)旨在利用N O D ／S C I D d x 鼠荷瘤模型證實(shí)分別使用不同的輸注途徑( 如將B 刪S C 骨髓腔注射，C I K ／N K 細(xì)胞靜脈輸注) 以及臨床上目前已經(jīng)開始應(yīng)

3、用的非同步輸注( B M M S C 和C I K ／N K 細(xì)胞的輸注時(shí)間一前一后各自錯(cuò)開) 能避免B M M S C 對C I K ／N K 細(xì)胞的負(fù)性影響，達(dá)到既保留B 刪S C 對H S C T 后的造血恢復(fù)促進(jìn)作用和C I K ／N K 細(xì)胞的抗腫瘤活性，又不至于增力f l G V H D 、造血延遲發(fā)病率以及移植后惡性血液病復(fù)發(fā)率的雙重目的，這對B 刪S C 和C I K ／N K 細(xì)胞將來在惡性血液病患者的臨床合理應(yīng)用具有

4、十分重要的意義。材料和方法1 ．實(shí)驗(yàn)對象5 - - - 6 周齡，體重2 0 “ - 2 5 9 的N O D ／S C I D 小鼠，雌雄不限：來自中山大學(xué)中山醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心( 符合S P F 標(biāo)準(zhǔn)) 。2 ．標(biāo)本來源骨髓( B M ) ：取自2 0 ～3 0 歲健康志愿者。臍血( C B ) ：來自本院健康足月妊娠產(chǎn)婦經(jīng)產(chǎn)道分娩之胎兒臍靜脈血。K 5 6 2 細(xì)胞株：來自本實(shí)驗(yàn)室( 臍血庫) 凍存的K 5 6 2 細(xì)胞株。3 ．

5、實(shí)驗(yàn)方法3 ．1 單個(gè)核細(xì)胞分離采用F i c o l 卜H a p a q u e 分離法。3 ．2 誘導(dǎo)擴(kuò)增C I K ／N K 細(xì)胞將收集到的臍血單個(gè)核細(xì)胞置于含有F L T - 3 、S C F 、I L - 2 、I L - 7 、I L - 1 5 五種細(xì)胞因子的培養(yǎng)體系中誘導(dǎo)2 1 d 。其中：1 ) 細(xì)胞因子的終濃度：F L T 一3 、S C F 、I L 一7 、I L 一1 5 為4 0 n g ／m l ，I L