2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文毛囊干細(xì)胞標(biāo)記與純化的相關(guān)研究姓名:譚挺申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):整形外科學(xué)指導(dǎo)教師:胡志奇20080420中文摘要另~方面是干細(xì)胞研究必須要面對的千細(xì)胞純化闖題,遐前普遍認(rèn)為HFSCs定位于毛囊上段的隆突(Bulge)區(qū),與基質(zhì)具有高黏附性是HFSCs分離培養(yǎng)困難的重要因素之一。但躁前傳統(tǒng)的分離方法,操作繁雜、勞動量大,同時獲得的毛囊隆突區(qū)細(xì)胞(HFBCs)中HFSCs純度不高,易污染,因而不便于實驗開展。目的:

2、1證實HFBCs在毛干上的定位,確定分離培養(yǎng)HFBCs的方法,并尋找技術(shù)改良。2。垂實HFSCs的表面標(biāo)記并嘗試尋找純純HFSCs的方法。3進(jìn)~步利用純化后的HFSCs和毛乳頭細(xì)胞(DPCs)混合進(jìn)行體內(nèi)誘導(dǎo)試驗,嘗試誘導(dǎo)出新生毛囊及亳發(fā)纖維。方法:至鼠和人毛囊的曼微解剖。采用顯微解割法分離出鼠及人的完整毛囊。將其置于倒置顯微鏡下觀察其形態(tài)結(jié)構(gòu)和區(qū)別。2鼠HFBCs的分離、培養(yǎng)。顯微分離培養(yǎng)法:無菌條捧下取7露齡Wistar大鼠觸須部皮

3、膚,在含雙抗(青鏈霉素)的DHanks’液中清洗2遍,在體視顯微鏡下用27號針頭將毛囊從組織中分離出來,置于0。25%Oispase酶中,矮℃消優(yōu)2h后用D—Hanks’液清洗,在體視顯微鏡下輕輕擠壓毛球部即可將毛囊Bulge區(qū)及毛干完整地分離出來,切去皮脂腺及毛囊中下段,保留Bulge區(qū)毛囊,將其置于含10%(體積比)胎牛血清的DMEM/F12辛b充培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。消化法:將組織法獲得盼毛囊Bulge區(qū)置于含025%Dispase酶

4、和01%膠原酶的混合消化液中,37℃消化20min,吹打制懸,吸取懸液至離心管中并加入含血清培養(yǎng)基終止消化,剩余組織塊繼續(xù)加入消化液消化,并分次采集細(xì)胞懸液,直至組織塊消化完全。收集離心后得到的細(xì)胞,并加入含血清培養(yǎng)基再次離心,最后加入含1096(體積比)胎牛血清的DMEM/F125b充培養(yǎng)基制成肇細(xì)胞懸液,接種到培養(yǎng)瓶中。觀察并比較兩種方法獲得的鼠HFBCs在DMEM/F12jF充培養(yǎng)基中體外培養(yǎng)的形態(tài)學(xué)和生物學(xué)特點。3人HFBCs的

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