CO2-2在BMP9誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的作用研究.pdf

1、目的:研究環(huán)氧合酶-2（Cyclooxygenase-2，COX-2）對(duì)骨形態(tài)發(fā)生蛋白-9（Bone morphogenetic protein-9，BMP9）誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)成骨分化的影響及其影響的可能機(jī)制。
　　方法:本課題采用組織化學(xué)染色及化學(xué)發(fā)光法實(shí)驗(yàn)、鈣鹽沉積實(shí)驗(yàn)、Western blot和PCR實(shí)驗(yàn)，研究COX-2對(duì)BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化的影響及其影響的可

2、能機(jī)制。實(shí)驗(yàn)具體步驟如下:
　　1.通過體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，檢測COX-2選擇性抑制劑對(duì)BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化的影響。
　　2.通過體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，檢測在BMP9和/或BMP9合并外源性過表達(dá)或沉默COX-2情況下，對(duì)BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化的影響。
　　3.通過體內(nèi)異位成骨實(shí)驗(yàn)，檢測COX-2不同表達(dá)狀態(tài)對(duì)BMP9誘導(dǎo)MSCs異位成骨能力的影響。
　　4.通過體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，分析COX-2對(duì)BMP9

3、誘導(dǎo)MSCs的BMPs/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。
　　結(jié)果:
　　1.抑制COX-2的酶活性或沉默表達(dá)COX-2，均能明顯抑制BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化。外源性過表達(dá)COX-2明顯增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)MSCs成骨分化。
　　2.抑制COX-2的酶活性或沉默表達(dá)COX-2，均能明顯抑制BMP9誘導(dǎo)重要成骨分化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子在MSCs中的表達(dá)，而外源性過表達(dá)COX-2增強(qiáng)BMP9誘導(dǎo)這些成骨分化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子在MSCs中的表。