蒲公英甾醇體外抗炎作用及對 MAPKs 信號傳導(dǎo)通路的調(diào)控.pdf

1、目的：本試驗采用傳統(tǒng)中藥蒲公英的主要成分蒲公英甾醇為研究對象，探討蒲公英甾醇的體外抗炎作用及其相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法：本試驗分為空白組、模型組、蒲公英甾醇（低、中、高劑量）組。通過脂多糖（LPS）刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞建立體外炎癥體系，采用 MTT法進(jìn)行細(xì)胞毒性測定，確定蒲公英甾醇安全使用劑量；通過 Griess法測得炎癥介質(zhì) NO的含量，通過 ELISA法測得炎癥介質(zhì) PGE2的含量；通過 RT-PCR檢測RAW264.7細(xì)胞中

2、COX-2和 iNOS mRNA的表達(dá)；通過Western blot法檢測iNOS和 COX-2蛋白的表達(dá)，并檢測ERK1/2、JNK和p38 MAPK及其磷酸化水平的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.蒲公英甾醇抗炎作用檢測結(jié)果顯示：與模型組相比較，蒲公英甾醇劑量組炎癥反應(yīng)明顯減弱，顯著抑制 LPS誘導(dǎo)的小鼠 RAW264.7細(xì)胞 NO和PGE2的生成；蒲公英甾醇分別不同程度的抑制了 iNOS和 COX-2 mRNA和蛋白的表達(dá)，

3、且呈一定的劑量依賴關(guān)系。
　　2.蒲公英甾醇抗炎機(jī)制檢測結(jié)果顯示：蒲公英甾醇顯著的抑制了 LPS誘導(dǎo)的小鼠 RAW264.7細(xì)胞 p38和 ERK1/2激酶的磷酸化，并呈劑量依賴關(guān)系，但對 JNK激酶磷酸化的抑制作用不顯著。
　　結(jié)論：蒲公英甾醇通過抑制 LPS誘導(dǎo)的小鼠 RAW264.7細(xì)胞ERK1/2和p38 MAPK信號傳導(dǎo)通路抑制 iNOS和 COX-2 mRNA和蛋白表達(dá)，從而降低細(xì)胞炎癥介質(zhì) NO和 PGE2的釋