拉米夫定聯(lián)合原兒茶酸等中藥有效成分體外抗HBV作用研究.pdf

1、乙型肝炎病毒(HBV)感染是世界性難題,不僅會(huì)造成急、慢性肝炎,而且與肝硬化和肝癌的發(fā)生密切相關(guān)。全世界約有3.5億HBV慢性感染者,每年有50-120萬(wàn)人死于HBV感染引起的疾病,其中死于肝癌的約為32萬(wàn)。我國(guó)是HBV感染的高發(fā)區(qū),約60％的人群感染過(guò)HBV,10％的人群為HBsAg攜帶者,多達(dá)1.2億,現(xiàn)有乙型肝炎患者約為1200萬(wàn),乙肝給國(guó)家和人民造成了極大的危害。 目前用于抗HBV治療的抗病毒藥物主要有a.干擾素和以拉米

2、夫定為代表的核苷類似物,但由于藥物長(zhǎng)期療效差、反跳率高、副作用等各種問(wèn)題限制了臨床應(yīng)用。中藥在抗HBV的輔助治療、恢復(fù)肝功能、調(diào)整免疫功能以及抗肝纖維化方面都取得進(jìn)展,占有一定優(yōu)勢(shì),但是在解決乙肝的根本問(wèn)題,即抗病毒治療方面尚無(wú)重大進(jìn)展。單一藥物治療乙肝根本不能達(dá)到患者的理想狀態(tài),參考治療艾滋病的經(jīng)驗(yàn),人們推測(cè)合理的聯(lián)合藥物治療可以提高藥物療效,由于拉米夫定的諸多優(yōu)點(diǎn),大多數(shù)聯(lián)合治療試驗(yàn)均將其納入,加之中醫(yī)藥在治療中恢復(fù)肝功能、防止肝纖

3、維化、調(diào)整免疫機(jī)能等方面都有一定的優(yōu)勢(shì),拉米夫定聯(lián)合中藥治療慢性乙型肝炎的思路已經(jīng)成為新的研究方向。 HepG2.2.15細(xì)胞是體外研究HBV復(fù)制較為理想的細(xì)胞感染模型。HepG2.2.15細(xì)胞是來(lái)源于HepG2細(xì)胞,整合了ayw型HBV全基因組,能夠部分模擬HBV的生活周期,表達(dá)各種HBV產(chǎn)物并能分泌HBV Dane顆粒的穩(wěn)定的人類肝癌細(xì)胞株,更接近于人體肝細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的實(shí)際情況,被研究者廣泛應(yīng)用于HBV復(fù)制的研究.因此本實(shí)驗(yàn)擬

4、應(yīng)用HepG2.2.15細(xì)胞模型體外研究拉米夫定分別與原兒茶酸(PA)、齊墩果酸(OA)、鞣花酸(EA)等中藥有效成份配伍使用,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)及熒光定量PCR,通過(guò)檢測(cè)藥物組合對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清中HBsAg、HBeAg濃度和HBV DNA的抑制作用,各組結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較用單因素方差分析,兩組間比較用t檢驗(yàn)。 結(jié)果表明在3TC+PA聯(lián)合應(yīng)用可明顯增強(qiáng)對(duì)HBV的抑制作用,PA:3TC=100時(shí),聯(lián)合用