鋅對熱暴露小鼠和巴馬香豬肝臟氧化應(yīng)激的影響.pdf

1、熱應(yīng)激影響動物的采食量，降低其生產(chǎn)和繁殖性能，給畜牧業(yè)生產(chǎn)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。熱應(yīng)激引起機(jī)體損傷的原因之一是誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生氧化應(yīng)激。目前，添加各種抗熱應(yīng)激藥物來緩解熱應(yīng)激對畜禽健康的影響。鋅(Zn)作為一種必需微量元素，具有促生長和抗氧化的特點(diǎn)。有研究報道，日糧中補(bǔ)充Zn能緩解夏季熱應(yīng)激，但其作用機(jī)制仍不清楚。也有研究表明，Zn能緩解糖尿病和酒精誘導(dǎo)的肝臟氧化損傷。肝臟不僅是Zn代謝的主要場所，同時也是熱休克的敏感器官之一。因此，研究Zn

2、對熱應(yīng)激動物肝臟功能的影響可為畜禽生產(chǎn)緩解熱應(yīng)激提供理論依據(jù)。本文就Zn對熱應(yīng)激小鼠和巴馬香豬肝臟的影響展開研究，旨在揭示機(jī)體抗應(yīng)激機(jī)制及Zn在熱應(yīng)激肝臟中的作用。
　　1鋅對熱暴露小鼠肝臟氧化損傷及Nrf2抗氧化通路的影響
　　24只8周齡的雄性ICR小鼠隨機(jī)分為四組，即對照組(TN，0)，熱處理組(HT，0)，加鋅組(TN，250)和加鋅熱處理組(HT，250)，并分別飼喂基礎(chǔ)日糧和補(bǔ)充250mg/kg Zn的日糧。預(yù)飼

3、30 d后，TN組（對照組和加鋅組）繼續(xù)飼養(yǎng)于25℃的環(huán)境中，而HT組（熱處理組和加鋅熱處理組）的小鼠暴露于升高的環(huán)境溫度(40-42℃)中，每天兩小時。連續(xù)熱暴露8d后，小鼠立即處死，采集血清和肝臟樣品。結(jié)果顯示:熱處理顯著減少小鼠體重、肝重及肝臟器官指數(shù)。組織學(xué)發(fā)現(xiàn)表明熱處理組肝臟細(xì)胞遭受嚴(yán)重的損傷，呈不規(guī)則排列和核固縮現(xiàn)象。熱處理顯著增加肝臟MDA濃度，顯著減少血清AKP水平，肝臟CuZn-SOD和GSH-PX活性。然而，補(bǔ)充25

4、0 mg/kg Zn顯著增加小鼠血清和肝臟鋅水平。與熱處理組相比，加鋅熱處理組的肝臟組織形態(tài)被修復(fù)，血清AST水平顯著減少，血清AKP水平趨于增加，肝臟CuZn-SOD和GSH-PX的活性顯著增加。而且，補(bǔ)充250 mg/kg Zn顯著增加肝臟Nrf2蛋白表達(dá)水平及Nrf2、Keap1基因水平。在熱處理條件下，補(bǔ)充250 mg/kg Zn也能顯著增加肝臟NQO1的基因水平。上述結(jié)果表明，補(bǔ)充250 mg/kg Zn能激活小鼠肝臟Nrf2

5、的表達(dá)，該濃度的鋅也能部分緩解熱誘導(dǎo)的肝臟氧化損傷，而且，鋅激活Nrf2抗氧化通路的能力可能是其保護(hù)肝臟免受熱誘導(dǎo)的損傷的機(jī)理之一。
　　2鋅對熱誘導(dǎo)的巴馬香豬肝臟氧化應(yīng)激及P62/Nrf2通路的影響
　　24只六月齡的雄性巴馬香豬，依照體重隨機(jī)分為4個處理組（每組6頭），即對照組(TN，0)，熱處理組(HT，0)，加鋅組(TN，1500)和加鋅熱處理組(HT，1500)，并分別飼喂基礎(chǔ)日糧和補(bǔ)充1500mg/kg Zn的日

6、糧。預(yù)飼含鋅日糧30 d后，兩TN組仍保持在25℃中，而兩HT組暴露于溫控(40℃)環(huán)境中，每天5h，連續(xù)八天(d31-d38)。結(jié)果顯示:在d31，d34和d38，熱處理顯著增加巴馬香豬的呼吸率、體表溫度和直腸溫度。熱處理也顯著降低巴馬香豬血清鋅水平，而補(bǔ)充1500 mg/kg Zn能顯著增加血清和肝臟中鋅的含量。肝臟組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)，熱處理導(dǎo)致肝臟組織炎性因子堆積，肝細(xì)胞界限不清楚;加鋅組肝臟組織出現(xiàn)炎性堆積和肝細(xì)胞核濃縮等現(xiàn)象;加鋅

7、熱處理組肝細(xì)胞排列紊亂，細(xì)胞內(nèi)線粒體數(shù)量顯著減少。加鋅誘導(dǎo)的血清ALT和AST的升高和熱處理誘導(dǎo)的血清AKP水平的減少進(jìn)一步說明，加鋅和熱處理引起肝臟損傷。補(bǔ)充1500 mg/kg Zn顯著增加肝臟MDA濃度，而熱處理顯著增加肝臟抗氧化酶CuZn-SOD和GSH-PX的活性。RT-PCR和Western Blot結(jié)果表明，熱處理增加肝臟Nrf2蛋白表達(dá)和上調(diào)Nrf2、SOD1基因表達(dá)。與對照組相比，熱處理組肝臟NQO1基因水平也顯著增加