丹參酮IIA通過(guò)Rho-Rho激酶系統(tǒng)對(duì)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　觀察波動(dòng)性高糖在體外誘導(dǎo)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的損傷作用;研究丹參酮ⅡA通過(guò)Rho/Rho激酶系統(tǒng)對(duì)損傷的血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用，并探討其機(jī)制。
　　方法:
　　1.波動(dòng)性高糖對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷作用
　　1.1實(shí)驗(yàn)分組:
　　A.正常對(duì)照組(恒定加入5.5 mmol/LGlu);
　　B.5.5 mmol/L/10 mmol/L Glu組(每24h輪換加入5.5 mmol/L

2、 Glu或10mmol/L Glu);
　　C.5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu組(每24h輪換加入5.5 mmol/L Glu或20mmol/L Glu);
　　D.5.5 mmol/L/30 mmol/L Glu組(每24h輪換加入5.5 mmol/L或30 mmol/LGlu)。
　　1.2實(shí)驗(yàn)方法:各組分別與HUVEC培養(yǎng)72 h，顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)變化，測(cè)定各組細(xì)胞的細(xì)胞活力(MTT)，

3、測(cè)定各組細(xì)胞上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)的含量。
　　2.丹參酮ⅡA通過(guò)Rho/Rho激酶系統(tǒng)對(duì)波動(dòng)性高糖損傷的HUVEC的保護(hù)作用
　　2.1實(shí)驗(yàn)分組:波動(dòng)性高糖損傷對(duì)照組（5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu波動(dòng)性高糖組）;丹參酮ⅡA保護(hù)組(在波動(dòng)性高糖損傷組基礎(chǔ)上加入濃度分別為10，30，50ug/mL的丹參酮ⅡA);維生素C陽(yáng)性對(duì)照組（在波動(dòng)性高糖損傷組基礎(chǔ)上加入濃度為100 mg/

4、L）。
　　2.2實(shí)驗(yàn)方法:各組HUVEC培養(yǎng)48 h，測(cè)定各組細(xì)胞上清液中MDA、SOD、NO、NOS含量及細(xì)胞中ROCK1 mRNA含量。
　　結(jié)果:
　　1.正常對(duì)照組與波動(dòng)性高濃度葡萄糖組HUVECs形態(tài)有明顯差異。培養(yǎng)液中SOD、NO的含量在波動(dòng)性高濃度葡萄糖組較對(duì)照組降低（P＜0.05，P＜0.01），MDA的含量在波動(dòng)性高濃度葡萄糖組較對(duì)照組升高(P＜0.05，P＜0.01)。
　　2.丹參酮ⅡA(

5、10，30，50 ug/mL)藥物保護(hù)組細(xì)胞培養(yǎng)液中SOD、NO、NOS的量均較5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu波動(dòng)性高糖組增高(P＜0.05，P＜0.01)，MDA的量均較5.5 mmol/L/20 mmol/L Glu波動(dòng)性高糖組降低(P＜0.05，P＜0.01)，其中以50 ug/mL丹參酮ⅡA組更為明顯(P＜0.01);ROCKⅠ mRNA含量在波動(dòng)性高糖損傷組較正常對(duì)照組升高(P＜0.05)，丹參酮ⅡA保護(hù)組較