肌苷對Tourette綜合征模型大鼠腦組織DAD-,2-R和DAT的影響.pdf

1、目的：研究肌苷對Tourette綜合征(TS)模型大鼠腦組織多巴胺D2受體(dopamine D2 receptor，DAD2R)和多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(dopaminetransporter，DAT)的影響，探討肌苷治療TS可能的作用機(jī)制；比較各治療組大鼠刻板行為的改善情況，評價(jià)肌苷的治療療效，為臨床治療TS提供相應(yīng)依據(jù)。 方法：1、實(shí)驗(yàn)分組：將64只SPF級雄性SD大鼠隨機(jī)分為：正常對照組、模型組、陽性對照組(氟哌啶醇0.5mg/

2、kg)、聯(lián)合用藥組A(氟哌啶醇0.3mg/kg+肌苷320mg/kg)、聯(lián)合用藥組B(氟哌啶醇0.25mg/kg+肌苷320mg/kg)、聯(lián)合用藥組C(氟哌啶醇0.3mg/kg+肌苷240mg/kg)、聯(lián)合用藥組D(氟哌啶醇0.25mg/kg+肌苷240mg/kg)、肌苷組(肌苷320mg/kg)，每組各8只大鼠。2、建立動物模型：選擇Diamond等創(chuàng)立的神經(jīng)毒素全身用藥法建立TS大鼠模型。3、刻板行為評分：從實(shí)驗(yàn)第8天開始，給各組大

3、鼠分別灌服不同劑量的生理鹽水、氟哌啶醇和(或)肌苷，1次/天，共28天。與此同時(shí)，采用雙盲法對大鼠刻板行為進(jìn)行評分。4、檢測指標(biāo)：4.1酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測大鼠腦組織DAD2R和DAT的含量。4.2原位雜交法檢測大鼠腦組織DAD2R mRNA的表達(dá)。4.3眼球組織病理檢查(HE染色，光鏡檢查)。 結(jié)果：1、肌苷對TS模型大鼠刻板行為(近期和遠(yuǎn)期)的影響：給藥7天和28天，各治療組大鼠刻板行為的評分與模型組相比明顯降低

4、(P<0.05)；給藥7天，各治療組間的評分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；給藥28天，肌苷組大鼠刻板行為的評分高于氟哌啶醇組和聯(lián)合用藥組A、B(P<0.05)，而與聯(lián)合用藥組C、D的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2、肌苷對TS模型大鼠腦組織DAD2R含量的影響：模型組DAD2R的含量高于正常對照組(P<0.05)：各治療組DAD2R的含量與模型組相比明顯降低(P<0.05)；肌苷組DAD2R的含量高于氟哌啶醇組和各聯(lián)合用藥組(P

5、<0.05)，而與正常對照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3、肌苷對TS模型大鼠腦組織DAT含量的影響：模型組與氟哌啶醇組DAT的含量低于正常對照組(P<0.05)，肌苷組DAT的含量高于正常對照組(P<0.05)；肌苷組DAT的含量高于模型組、氟哌啶醇組以及聯(lián)合用藥組A、C、D(P<0.05)，而與聯(lián)合用藥組B之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4、肌苷對大鼠腦組織DAD2R mRNA表達(dá)的影響：4.1光鏡下各組大鼠腦組織D

6、AD2R陽性細(xì)胞的分布：可見DAD2R陽性細(xì)胞的細(xì)胞核和(或)細(xì)胞漿呈棕黃色，廣泛分布于大腦皮質(zhì)、海馬和紋狀體等處，在皮質(zhì)的分布最為密集。DAD2R陽性細(xì)胞呈圓形、錐體形或不規(guī)則形，有些DAD2R陽性細(xì)胞有突起，這些突起向各個(gè)方向伸展，無明顯的方向性。尤以模型組DAD2R陽性細(xì)胞分布最為密集。4.2大鼠腦組織DAD2R mRNA表達(dá)的比較：模型組DAD2R陽性細(xì)胞比率高于正常對照組(P<0.05)：各治療組DAD2R陽性細(xì)胞比率低于模型

7、組(P<0.05)；肌苷組DAD2R陽性細(xì)胞比率高于氟哌啶醇組和聯(lián)合用藥組A、C(P<0.05)，而與正常對照組和聯(lián)合用藥組B、D之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5、各組大鼠眼出血發(fā)生率的比較：5.1大鼠眼出血肉眼觀察：連續(xù)給藥28天后發(fā)現(xiàn)：氟哌啶醇組眼出血的發(fā)生率高于聯(lián)合用藥組A、C，但三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；其余各組均未出現(xiàn)該不良反應(yīng)。5．2大鼠出血眼球病理檢查：角膜上皮增厚、炎細(xì)胞彌漫性浸潤；鞏膜炎細(xì)胞浸潤，

8、血管破裂出血；角膜鞏膜交界處炎細(xì)胞浸潤，血管高度擴(kuò)張、破裂出血；視網(wǎng)膜正常梳狀紋理消失、內(nèi)界炎癥反應(yīng)性勻質(zhì)樣粉染物質(zhì)沉積，細(xì)胞排列紊亂。 結(jié)論：1、模型組DAD2R的含量高于正常對照組，而DAT的含量低于正常對照組，表明TS模型大鼠刻板行為的發(fā)生與中樞DAD2R超敏感有關(guān)。2、肌苷組DAD2R的含量低于模型組，而與正常對照組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；DAT的含量高于模型組與正常對照組。推測肌苷改善TS模型大鼠的刻板行為的作用機(jī)制并非