陰道毛滴蟲對甲硝唑及替硝唑抗性的分子流行病學及耐藥因素的研究.pdf

1、J898635原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究所取的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式表明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者日期：年月日學位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留

2、或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱；本人授權(quán)鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影音、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表使用學位論文或該學位論文直接相關(guān)的學術(shù)論文或成果時，第一署名單位仍為鄭州大學。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學位論文作者日期年月日■—●●，，，趾●■■krL●■I2010屆碩士學位論文————通㈣一陰道毛滴蟲對甲硝唑及替硝唑抗性的分子流行病

3、學及耐藥因素研究研究生杜紀英導(dǎo)師薛長貴教授鄭州大學基礎(chǔ)醫(yī)學院病原生物學教研室河南鄭州450052摘要目的對河南女性陰道炎的流行情況進行調(diào)查，了解河南女性滴蟲病的患病率；收集蟲株進行甲硝唑及替硝唑最小致死劑量的測量，并對甲硝唑抗性與人型支原體共生之間的關(guān)系進行研究。方法流行病學調(diào)查在鄭州市婦幼保健院和內(nèi)黃縣中醫(yī)院的婦科門診進行，對960例健康體檢者及門診患者通過問卷調(diào)查就診者的年齡、職業(yè)、婚姻狀況、衛(wèi)生狀況及生活流動性，對就診者的陰道分泌

4、物進行常規(guī)涂片檢查。研究所用陰道毛滴蟲蟲株標本由鄭州市婦幼保健院檢驗科提供，標本來自女性患者。研究共收集了45例標本，用肝浸湯培養(yǎng)基在37℃溫箱中培養(yǎng)，有2例培養(yǎng)失敗，2例污染，余4l例蟲株進行培養(yǎng)，培養(yǎng)3代后至無菌培養(yǎng)期，進行甲硝唑及替硝唑最小致死劑量(MLC)測量。4l例蟲株提取基因組DNA，用PCR方法檢測41例陰道毛滴蟲與人型支原體的共生情況。利用MGEPCR技術(shù)，分析部分敏感蟲株與耐藥蟲株Tvmarl基因的位置多態(tài)性，利用臨位

5、相接法(Neighbourjoining，NJ)，并借助MEGA31分析軟件，以Tvmarl基因的位置變化為基礎(chǔ)構(gòu)建聚類樹狀圖。結(jié)果1河南省女性滴蟲病的患病率為510％，且與年齡、職業(yè)、婚姻狀況及衛(wèi)生狀況具有相關(guān)性，年齡、職業(yè)分布經(jīng)統(tǒng)計學處理(P005)具有意義。2在4l例蟲株中有4例甲硝唑抗性株(975％)和13例敏感性降低的蟲株，在4例抗性蟲株中，有2例蟲株對替硝唑的敏感性降低，41例蟲株其甲硝唑抗性平均值為12611xg／ml，而

6、替硝唑抗性平均值為171Itg／ml，甲硝唑抗性平均值是替硝唑抗性平均值的737倍。341例陰道毛滴蟲蟲株中，31例蟲株被證明有人型支原體的共生，感染率為7561％。在3l例人型支原體感染陽性的陰道毛滴蟲蟲株中，包括了4例抗性株和13例甲硝唑敏感性降低的蟲株。另外，人型支原體感染陽性的蟲株，其甲硝唑抗性的平均值1572ug／ml約是人型支原體感染陰性的蟲株甲硝唑抗性平均值416ug／ml的378倍。4本次試驗利用Tvmarl的位置多態(tài)性