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文檔簡介
1、 本研究從2002年和2004年昆明地區(qū)嬰幼兒腹瀉的輪狀病毒感染者大便樣品中，通過RT-PCR，PCR擴增了22株輪狀病毒株的NSP4全長基因及其cDNA序列，并對cDNA序列測序，發(fā)現(xiàn)這些病毒株同屬Wa株輪狀病毒株，它們的NSP4氨基酸序列高度保守，僅在79位、139位氨基酸位點存在差異。我們選取了139位氨基酸不同(Ⅴ/Ⅰ)的兩株病毒株：02K1株和04K44株，(02K1株139位氨基酸為V，04K44株為Ⅰ)，將兩株病毒株
2、NSP4蛋白的86～ 175氨基酸的編碼序列連入表達載體pGEX-5X-1，構(gòu)建重組質(zhì)粒：02K1-pGEX-5X-1-NSP486～175，04K44-pGEX-5X-1-NSP486～175。為了評價純化出的這兩株病毒NSP4蛋白氨基酸位點變異和毒力差異的關(guān)系，我們建立了ICR乳鼠腹瀉模型：在ICR乳鼠中，通過腹腔注射4種不同蛋白的純化液，比較它們致小鼠腹瀉的差異。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：2種融合蛋白GST-NSP486～175蛋白的毒力均比兩種
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