白草花葉病毒變異的初步研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)對(duì)來(lái)自山西忻州的一些表現(xiàn)病毒病癥狀的白草、高粱和玉米材料(共15個(gè)樣品)采用生物學(xué)，血清學(xué)和分子生物學(xué)等方法和技術(shù)進(jìn)行了檢測(cè)和序列的分析、比對(duì)?！　±枚喾N植物病毒的抗血清對(duì)全部標(biāo)樣進(jìn)行ELISA檢測(cè)，結(jié)果表明15個(gè)樣品都與白草花葉病毒的抗血清反應(yīng)。其中10號(hào)樣品既與白草花葉病毒(PenMV)的抗血清反應(yīng)，還與甘蔗花葉病毒北京分離物(SCMV-BJ)的抗血清呈陽(yáng)性反應(yīng)。使用SCMV-BJ特異性的引物從10號(hào)樣品中擴(kuò)增出約700b

2、p的片段。包括3'-NTR和CP基因的C末端。所得的核苷酸序列與SCMV-BJ的同源性達(dá)到99.28％。所得CP的C末端其氨基酸序列與SCMV-BJ的同源性達(dá)100％。結(jié)合血清學(xué)結(jié)果，得出結(jié)論：10號(hào)樣品中同時(shí)含有兩種病毒，屬于混合侵染。　　利用白草花葉病毒特異性引物擴(kuò)增這15個(gè)分離物的外殼蛋白基因序列。序列分析表明，15個(gè)樣品的外殼蛋白基因均為909個(gè)核苷酸(含終止密碼子)，編碼302個(gè)氨基酸。這15個(gè)樣品再加上已知的PenMV-A

3、，PenMV-B，PenMV-C三個(gè)分離物兩兩比對(duì)的核苷酸序列同源性在91.1％～100％，其中1號(hào)，4號(hào)，10號(hào)，15號(hào)的同源性為100％，11號(hào)和13號(hào)同源性也為100％，；氨基酸序列同源性在97.7％～100％。15個(gè)分離物均含有PenMV?！　⊥ㄟ^(guò)比對(duì)這15個(gè)樣品的外殼蛋白基因序列，可知15個(gè)樣品中只有2號(hào)和14號(hào)與蚜傳密切相關(guān)的保守基序?yàn)镈AG，其余均突變?yōu)镈TG?！　】寺×?號(hào)、13號(hào)和15號(hào)樣品的HC-Pro的部分序列