肉雞鸚鵡熱衣原體病病原的分離與鑒定.pdf

1、本研究通過對北京郊區(qū)發(fā)生疑似鸚鵡熱衣原體病的7個(gè)肉雞群，采集血清進(jìn)行間接血凝試驗(yàn)，在初步診斷為肉雞鸚鵡熱衣原體病的基礎(chǔ)上，將采集的病料接種SPF雞胚和感染McCoy細(xì)胞進(jìn)行了病原分離，并通過特異性免疫熒光染色、姬姆薩染色觀察包涵體、碘染色、磺胺抑制等試驗(yàn)，初步確認(rèn)該病原為鸚鵡熱衣原體?！　〗rn操作元序列(即16S-23SrRNA間隔區(qū)及側(cè)翼序列)雙重PCR法擴(kuò)增鸚鵡熱衣原體，在一個(gè)反應(yīng)中同時(shí)擴(kuò)增出預(yù)期的111bp和627bp特異

2、性片段，進(jìn)一步驗(yàn)證了該分離菌株為鸚鵡熱衣原體。建立的雙重PCR法的最低檢出限為500fg/μl，檢測平均陽性率為83.4％-97.2％，符合率達(dá)95％；均高于免疫熒光試劑盒檢測的平均陽性率和符合率(71.3％-80.7％，80％)?！　?dòng)物回歸試驗(yàn)中，通過肉雞自然感染和實(shí)驗(yàn)性感染鸚鵡熱衣原體、一次感染與反復(fù)感染的病理組織學(xué)變化進(jìn)行比較，首次證實(shí)了肉雞是鸚鵡熱衣原體的自然宿主和實(shí)驗(yàn)宿主?！　≡谇捌谘鍖W(xué)與病原分離鑒定的基礎(chǔ)上，用鸚鵡熱