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1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文裂殖壺菌(SchizochytriumlimacinumSR21)發(fā)酵制備二十二碳六烯酸(DHA)過(guò)程的初步研究姓名:陳誠(chéng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:梅樂(lè)和20070516浙江大學(xué)顧上論文摘要其次,在搖瓶中對(duì)SchizochytriumlimacinumSR21制備DHA的液體發(fā)酵條件進(jìn)行了考察和優(yōu)化。首先,考察了碳源、氮源以及金屬離子等培養(yǎng)基組成對(duì)菌體生長(zhǎng)和DHA產(chǎn)量的影響。發(fā)現(xiàn)葡萄糖、酵母粉和蛋白胨
2、濃度對(duì)單位菌體的DHA含量無(wú)顯著影響、但對(duì)細(xì)胞干重具有正效應(yīng);而K能促進(jìn)菌體生長(zhǎng),但會(huì)降低單位菌體中的DHA含量。其后,采用單因素實(shí)驗(yàn)考察了種齡、接種量、裝液量、發(fā)酵液初始pn值和發(fā)酵溫度等操作條件的效應(yīng),初步確定了各操作條件的最適參數(shù),并發(fā)現(xiàn)變溫培養(yǎng)方式有利于提高DHA在脂質(zhì)中的含量。最后,采用均勻設(shè)計(jì)方法對(duì)等關(guān)鍵因素進(jìn)行了進(jìn)一步的優(yōu)化,通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果回歸建模的方法確定最適培養(yǎng)基組成為:葡萄糖1459L1,酵母粉269L1,蛋白胨52
3、9L1,K濃度10mML1,海水晶209I『1,磷酸鹽緩沖體系,pH68:最適操作條件為:裝液量為250ml的三角燒瓶中裝20ml的發(fā)酵液,種齡24h,接種量4%,培養(yǎng)時(shí)間5天,前三天25℃培養(yǎng),后兩天20℃培養(yǎng)。在此優(yōu)化條件下,細(xì)胞干重達(dá)到55649L1,DHA產(chǎn)量達(dá)到12619L1。與優(yōu)化前的DHA產(chǎn)量4159L1相比,優(yōu)化使DHA產(chǎn)量提高了204倍。最后,對(duì)SR21菌株進(jìn)行了誘變育種以改變其最適溫度低于常溫這一不利于工業(yè)化生產(chǎn)的缺
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