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文檔簡介
1、為了揭示山東省流行的PRRSV的來源及遺傳學背景，并為山東省PRRS的防治提供一種安全有效的疫苗，本研究對PRRSVSD2株的ORF5、ORF6進行了測序，根據哺乳動物細胞真核表達載體pIRESMCSAMCSB多克隆位點的序列和豬繁殖與呼吸綜合征病毒SD2株ORF5、ORF6基因閱讀框架，同時考慮外源基因的表達量在基因起始密碼子的前面加入Kozak序列，分別設計了針對ORF5、ORF6的引物P5s/P5r，P6s/P6r。pIRES和O
2、RF6PCR產物經NheⅠ和EcoRⅠ雙酶切后，連接構建pIRES-ORF6。pIRES-ORF6和ORF5PCR產物經XbaⅠ和NotⅠ雙酶切后，連接構建pIRES-ORF5ORF6。經PCR、雙酶切鑒定和測序證明成功構建了轉移載體pIRES-ORF5ORF6?！ 】傊狙芯拷沂玖四壳傲餍杏谏綎|省的PRRSV的來源及遺傳學背景，成功構建了能同時表達兩種主要保護性抗原蛋白的真核表達載體，并在哺乳動物細胞CHO中成功表達，這在疫苗的研
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