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文檔簡(jiǎn)介
1、為了揭示山東省流行的PRRSV的來(lái)源及遺傳學(xué)背景，并為山東省PRRS的防治提供一種安全有效的疫苗，本研究對(duì)PRRSVSD2株的ORF5、ORF6進(jìn)行了測(cè)序，根據(jù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞真核表達(dá)載體pIRESMCSAMCSB多克隆位點(diǎn)的序列和豬繁殖與呼吸綜合征病毒SD2株ORF5、ORF6基因閱讀框架，同時(shí)考慮外源基因的表達(dá)量在基因起始密碼子的前面加入Kozak序列，分別設(shè)計(jì)了針對(duì)ORF5、ORF6的引物P5s/P5r，P6s/P6r。pIRES和O
2、RF6PCR產(chǎn)物經(jīng)NheⅠ和EcoRⅠ雙酶切后，連接構(gòu)建pIRES-ORF6。pIRES-ORF6和ORF5PCR產(chǎn)物經(jīng)XbaⅠ和NotⅠ雙酶切后，連接構(gòu)建pIRES-ORF5ORF6。經(jīng)PCR、雙酶切鑒定和測(cè)序證明成功構(gòu)建了轉(zhuǎn)移載體pIRES-ORF5ORF6?！ 】傊狙芯拷沂玖四壳傲餍杏谏綎|省的PRRSV的來(lái)源及遺傳學(xué)背景，成功構(gòu)建了能同時(shí)表達(dá)兩種主要保護(hù)性抗原蛋白的真核表達(dá)載體，并在哺乳動(dòng)物細(xì)胞CHO中成功表達(dá)，這在疫苗的研
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