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文檔簡介
1、華南師范大學碩士學位論文不同葡萄糖濃度對成肌細胞時鐘基因表達的影響及其機制彭桃芳導師姓名職稱:劉承宜教授專業(yè):細胞生物學院系:生命科學學院答辯時間:2013年5月28日摘要不同葡萄糖濃度對成肌細胞時鐘基因表達的影響及其機制專業(yè)名稱:細胞生物學申請者姓名:彭桃芳導師姓名:劉承宜教授摘要研究目的:晝夜節(jié)律是影響睡眠和糖尿病等人體健康狀況的一個重要因素。研究表明,高碳水化合物飲食是導致糖尿病的原因之一,高糖也能影響細胞時鐘基因的表達。本文研究
2、了不同葡萄糖濃度45mM、225mM、90mM和180mM對C2C12小鼠成肌細胞時鐘基因周期基因(Period,Per)1、Per2、D元件結合蛋白基因(albuminD—elementbindingprotein,Dbp)表達的影響。研究方法:本實驗分為五組,分別為45mM組、225mM組(對照組)、90mM組和180mM組。實驗細胞系取同一批處于對數生長期的C2C12小鼠成肌細胞。以46104/ml的密度接種于細胞培養(yǎng)皿,細胞生長
3、兩天后開始實驗。根據Asher等人(2008)所用方法,用100nM地塞米松休克處理15min,以同步C2C12小鼠成肌細胞的時鐘基因表達時相,然后將C2C12小鼠成肌細胞分別置于含有終濃度為45mM、225mM、90mM、180mMD一葡萄糖的培養(yǎng)基中,常規(guī)孵育培養(yǎng)。24小時內,每隔6h檢測細胞中時鐘基因Perl、Per2、Dbp和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸輔酶(nicotinamideadeninedinucleotide,NAD)依賴的
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