25751.基于色譜質(zhì)譜聯(lián)用的代謝組學(xué)樣本收集處理程序標(biāo)準(zhǔn)化和代謝綜合征研究

1、中圖分類號(hào)Q魚至2UDC弛碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!噬3基于色譜質(zhì)譜聯(lián)用的代謝組學(xué)樣本收集處理程序標(biāo)準(zhǔn)化和代謝綜合征研究Standardizationofcollectionandpretreatmentformetabolomicssamplesandmetabolicsyndromestudybasedonchromatography—massspectrometry作者姓學(xué)科專研究方學(xué)院(系、指導(dǎo)教名：林璋業(yè)：分析化學(xué)向：代謝組學(xué)所、

2、)：化學(xué)化工學(xué)院師：盧紅梅教授論文答辯日期蘭!!生!：!!答辯委員會(huì)主席中南大學(xué)2014年4月中南大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要基于色譜質(zhì)譜聯(lián)用的代謝組學(xué)樣本收集處理程序標(biāo)準(zhǔn)化和代謝綜合征研究摘要：代謝組學(xué)是一門新興的生物學(xué)分支，是20世紀(jì)90年代末繼三大組學(xué)即基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)之后興起和發(fā)展起來(lái)的，是研究生物系統(tǒng)受到了刺激或擾動(dòng)后其代謝組變化的科學(xué)。代謝組學(xué)著重研究代謝物質(zhì)的代謝途徑及其所受到各種內(nèi)、外在因素影響下代謝途徑的變化來(lái)研

3、究某些病理生理過(guò)程中所產(chǎn)生的系列事件。近年來(lái)，代謝組學(xué)在各研究領(lǐng)域也顯現(xiàn)出了廣闊的應(yīng)用前景包括疾病診斷、藥物研發(fā)、藥效和毒性評(píng)價(jià)、藥物作用機(jī)理研究及植物代謝組學(xué)白分寸。血清是代謝組學(xué)中一種理想的用來(lái)尋找生物標(biāo)記物的生物流體。首先，本實(shí)驗(yàn)采用了氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)系統(tǒng)全面地評(píng)估了血清樣本在收集處理過(guò)程中所有可能對(duì)代謝輪廓產(chǎn)生影響的因素，主要包括：血液收集過(guò)程中收集管的種類、抗凝劑的選擇及凝結(jié)過(guò)程中時(shí)間和溫度的不同及重復(fù)多次的冷凍解凍循環(huán)

4、等。結(jié)果表明：樣本的收集、處理和儲(chǔ)存程序中各步驟對(duì)血清代謝輪廓的影響程度不同。其次，在代謝組學(xué)的實(shí)際研究中，血清血漿二者通常被認(rèn)為在組成和性質(zhì)上相似而被任意取代來(lái)進(jìn)行相關(guān)生物和臨床的研究。血清和血漿是否完全一樣或二者是否可以任意替代來(lái)進(jìn)行代謝組學(xué)的相關(guān)研究呢此處采用基于質(zhì)譜的兩種檢測(cè)手段(GCMS；LC—QTOFMS)來(lái)全面分析比較大鼠血清和血漿的代謝指紋圖譜的區(qū)別。GCMS的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：258％的代謝物在血清血漿樣本中含量存在顯著性

5、差異(卜檢驗(yàn)，PO05)，另外因代謝物在血清中的含量普遍高于血漿由此得出血清比血漿更適宜于生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)；LCQTOF—MS研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，正、負(fù)離子模式下分別識(shí)別出了13種和7種內(nèi)源性代謝物主要對(duì)血清血漿指紋圖譜的分類貢獻(xiàn)最大。通過(guò)以上兩部分基礎(chǔ)研究實(shí)現(xiàn)了將實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部代謝組學(xué)的操作程序進(jìn)行了規(guī)范化并建立了相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)操作程序(StandardOperationProcedure，SOP)，為后期進(jìn)行長(zhǎng)期的疾病研究和生物標(biāo)記物的發(fā)現(xiàn)奠定