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文檔簡介
1、西南大學碩士學位論文家蠶表皮高豐度表達基因BmGCP2的克隆、表達及分析姓名:李智申請學位級別:碩士專業(yè):特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)指導教師:周澤揚20090501兩南大學碩十學位論文將BmGCP2P(不含信號肽序列)基因亞克隆到pGEX4T1表達載體,構建重組表達質粒,并將該重組質粒轉化到BL21表達菌株。通過IPTG誘導重組菌BmGCP2P/pGEX4T一1表達蛋白,得到一個約53kD的重組蛋白,其中標簽蛋白約26kD,目的蛋白約27kD,與
2、預測分子量相符合。通過表達條件的優(yōu)化,發(fā)現(xiàn)最佳的誘導條件為37℃、02mmol/LIPTG誘導4h。蛋白組分鑒定表明,誘導表達的重組蛋白以包涵體的形式表達。4、BmGCP2蛋白的表達特性研究利用親和柱純化BmGCP2P原核表達蛋白,并制備抗體。Westernblotting分析家蠶BmGCP2蛋白在5齡3天各組織中的表達情況,結果表明,BmGCP2蛋白只在家蠶表皮表達,這與曰肌GCP2基因mRNA水平的表達情況一致。綜上所述,本研究克隆
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