農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)化玉米的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該研究通過(guò)大量的試驗(yàn),對(duì)自交系J7-3、B73、77及它們與A188花粉的雜交F<,1>幼胚的再生影響因素作了研究,建立了J7-3、B73的高效再生系統(tǒng),并借助自交B73及其Gus基因瞬時(shí)表達(dá)率建立了適合載體的遺傳轉(zhuǎn)化體系,且用以上建立的體系獲得了轉(zhuǎn)GM-CSF基因植株.試驗(yàn)結(jié)果如下:1、在所用的培養(yǎng)條件下,基因型是影響玉米幼胚再生的主要因素,激素濃度配比、胚性愈傷形成到移至分化培養(yǎng)基中的天數(shù)、幼胚發(fā)育狀態(tài)等對(duì)玉米幼胚高效再生也有很大的

2、影響,含N6鹽的培養(yǎng)基和含Ms鹽的培養(yǎng)基分別用于誘導(dǎo)、分化再生優(yōu)于單一使用,2、4-D、DC、AgNO<,3>濃度分別為1.0mg/L配合作用優(yōu)于單獨(dú)使用或其它濃度配比,胚性愈傷形成后6-8天應(yīng)移至分化培養(yǎng)基,少量的ABA(0.03mg/L)可以提高正常植株百分率,整個(gè)再生過(guò)程只需40天左右的時(shí)間.2、用自交系B73建立遺傳轉(zhuǎn)化體系,發(fā)現(xiàn)浸染時(shí)間以9分鐘為宜,共培養(yǎng)3天,篩選之前,在不含選擇壓的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上,維持培養(yǎng)4-5天,有利于轉(zhuǎn)化

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