禽副粘病毒-2的基因組序列測(cè)定與分析.pdf

1、在該實(shí)驗(yàn)室已對(duì)PMV-2的流行病學(xué)、致病性、診斷方法、單抗制備等做了大量研究的基礎(chǔ)上,該研究將進(jìn)行PMV-2基因組的部分基因序列測(cè)定與分析,從分子水平上對(duì)該病毒做進(jìn)一步的研究.該實(shí)驗(yàn)主要完成了下列工作：（1）收獲四株P(guān)MV-2;（2）提取4株病毒的RNA,經(jīng)RT-PCR,獲得4株毒株的HN基因,同時(shí)首次測(cè)得F基因與HN基因之間的序列.（3）我們的研究還從分子水平上進(jìn)一步論證了分離自獼猴的Murayama病毒與Yucaipa病毒有著非常密

2、切的血清學(xué)關(guān)系,Murayama病毒可能是Yucaipa病毒或類Yucaipa病毒感染獼猴后的適應(yīng)株.（4）在HN基因5'端設(shè)計(jì)步移引物進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,將反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物構(gòu)建質(zhì)粒文庫,通過點(diǎn)雜交及Southern雜交,篩選陽性克隆,測(cè)序產(chǎn)物做BLAST比較,并與本科病毒的L基因的核苷酸序列、氨基酸序列進(jìn)行了比較,進(jìn)一步證實(shí)我們?cè)趪?guó)際上首次完成了PMV-2標(biāo)準(zhǔn)毒株的L基因3'端的序列測(cè)定.（5）用Pfu保真酶擴(kuò)增HN基因,連接入PTYB-2表達(dá)載體