日糧黃曲霉毒素B1向牛奶的轉(zhuǎn)化及其對(duì)奶牛生產(chǎn)性能與健康的影響.pdf

1、針對(duì)當(dāng)前奶牛養(yǎng)殖過(guò)程中奶牛采食黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)污染飼料帶來(lái)的牛奶和奶制品黃曲霉毒素M1(Aflatoxin M1，AFM1)的污染問題，本文研究了日糧中AFB1到牛奶的轉(zhuǎn)化率、牛奶中AFM1的清除規(guī)律，以及AFB1對(duì)奶牛生產(chǎn)性能和健康的影響。同時(shí)，評(píng)價(jià)了吸附劑Solis Mos(SM)的添加效果。具體研究?jī)?nèi)容與獲得的結(jié)果如下。
　　1、長(zhǎng)三角地區(qū)奶牛場(chǎng)日糧中AFB1和原料奶AFM1的季節(jié)性交化（

2、試驗(yàn)一）
　　本試驗(yàn)調(diào)研了長(zhǎng)三角地區(qū)18家奶牛場(chǎng)全混合日糧(Total Mixed Ration，TMR)中AFB1和原料奶AFM1在4個(gè)季節(jié)的發(fā)生率和污染程度。每個(gè)季節(jié)收集15份TMR樣本，4個(gè)季節(jié)共采集60份TMR樣本;而每個(gè)季節(jié)從奶缸中采集18份混合牛奶樣，4個(gè)季節(jié)共采集72份原料奶樣。TMR中AFB1測(cè)定應(yīng)用HPLC-FLD方法(檢出限為0.3μg/kg)，牛奶AFM1測(cè)定應(yīng)用LC-MS/MS方法(檢出限為0.01μg/L

3、)。應(yīng)用SAS9.2(SAS Institute Inc.，Cary, NC)單因素方差分析程序檢驗(yàn)4個(gè)季節(jié)的TMRAFB1和牛奶AFM1的濃度差異。AFB1在28份TMR樣本(46.7％)中被檢出，AFB1濃度范圍0.332-4.040μg/kg。冬季TMR中AFB1濃度顯著高于春季和秋季(P＜0.05)，但與夏季沒有顯著差別。總共72份奶樣中有43份牛奶樣檢測(cè)出AFM1(59.7％)，其濃度范圍為0.01-0.42μg/L。冬季原料

4、奶中AFM1濃度(0.123μg/L)顯著高于其他季節(jié)，春季(0.029μg/L)、夏季(0.032μg/L)與秋季(0.032μg/L)牛奶樣AFM1濃度差異不顯著(P＞0.05）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，TMR中AFB1以及牛奶中AFM1的污染呈現(xiàn)季節(jié)性差異，冬季和夏季飼料易致AFB1污染，而冬季牛奶污染AFM1風(fēng)險(xiǎn)最高，因此對(duì)牧場(chǎng)飼料和牛奶的AFs管理中需要考慮季節(jié)性因素。
　　2.日糧AFB1向牛奶的轉(zhuǎn)化以及日糧中添加SM的效果（

5、試驗(yàn)二）
　　本研究的目的是研究日糧AFB1到乳AFM1的轉(zhuǎn)化率和乳中AFM1的清除規(guī)律，并評(píng)價(jià)SM對(duì)攝入不同劑量AFB1的奶牛乳中AFM1、奶牛血液生化指標(biāo)和瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響。選擇24頭泌乳后期經(jīng)產(chǎn)荷斯坦奶牛(泌乳天數(shù)271±29 d;奶產(chǎn)量21.6±3.1 kg/d)，隨機(jī)分為3組，每組8頭。3組奶牛被安排進(jìn)行3個(gè)小試，每個(gè)小試含2個(gè)處理，每個(gè)處理4頭牛，采用交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)。小試1、2、3中奶牛分別采食含AFB1含量為0、20

6、、40μg/kg.DM的日糧，每個(gè)小試中，奶牛接受對(duì)照組或添加0.25％的SM處理組。每個(gè)小試分為兩個(gè)連續(xù)的時(shí)期，每期含有4d預(yù)試期(d1-4)、7 dAFB1飼喂期(d5-11)和5d清除期(d12-16)。完成第一期試驗(yàn)后，將對(duì)照組和處理組對(duì)換，進(jìn)入第二期試驗(yàn)。在每期試驗(yàn)第1、2和10-14 d，采集TMR和牛奶樣本;d1、11和14的晨飼前，通過(guò)尾靜脈采集10mL血液至肝素管;d1和11晨飼后2h，通過(guò)口腔瘤胃導(dǎo)管采集50 mL瘤

7、胃液。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，采食基礎(chǔ)日糧奶牛乳中AFM1的本底水平是0.003μg/L;采食含20μg/kg AFB1日糧的奶牛乳中AFM1均值為0.105μg/L，日糧AFB1到牛奶的轉(zhuǎn)化率為0.56％;采食含40μg/kg AFB1日糧的奶牛乳中AFM1均值為0.209μg/L，日糧AFB1到牛奶的轉(zhuǎn)化率為0.59％。當(dāng)奶牛停止采食AFB1污染日糧3d后，乳中AFM1即可清除。添加SM到含20μg/kg AFB1的日糧中能夠顯著減少奶中AFM1

8、濃度(0.105 vs.0.088μg/L，P＜0.05)，降低AFB1向牛奶中的轉(zhuǎn)化率(0.56vs.0.46％，P＜0.05);但在含40μg/kg AFB1日糧中添加SM并不能降低牛奶中AFM1濃度。在基礎(chǔ)日糧中添加SM能夠增加總揮發(fā)性脂肪酸(VFA)濃度(99.6vs.94.2 mM，P＜0.05)、微生物蛋白(MCP)含量(3.3 vs.2.9 mg/mL，P＜0.05)以及羧甲基纖維素酶(CMCase)活性(0.34 vs.

9、0.26 U，P＜0.05);在含20μg/kgAFB1日糧中添加SM能增加總VFA濃度(99.8 vs.93.4 mM，P＜0.05)，MCP含量(3.2 vs.2.7 mg/mL，P＜0.05)以及CMCase活性(0.28 vs.0.22 U，P=0.07);但是，在含40μg/kg AFB1日糧中添加SM并未改變瘤胃發(fā)酵參數(shù)。無(wú)論是在基礎(chǔ)日糧，還是在AFB1污染日糧中添加0.25％的SM，均不影響奶牛泌乳性能、肝功能和體液免疫，

10、但可降低機(jī)體氧化應(yīng)激。
　　本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中AFB1轉(zhuǎn)化為乳AFM1的比率為0.46％-0.59％，乳中AFM1徹底清除需要3 d;添加SM不影響奶牛的產(chǎn)奶量和乳成分;在20μg/kgAFB1日糧中添加SM可降低奶牛AFM1濃度，改善奶牛健康狀況。
　　3.長(zhǎng)期攝入AFB1對(duì)奶牛生產(chǎn)性能和健康的影響以及SM的添加效果（試驗(yàn)三）
　　本研究的目的是評(píng)估長(zhǎng)期攝入AFB1的奶牛泌乳性能和健康狀況，以及添加霉菌毒素吸附劑

11、SM的效果。40頭泌乳初期荷斯坦奶牛根據(jù)泌乳天數(shù)(33±7 d)和奶產(chǎn)量(33.9±3.1 kg)隨機(jī)分為4個(gè)處理組。采用2因子2水平交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)，即AFB1(0或20μg/kg DM)和添加SM（0或0.25％）。奶產(chǎn)量和乳成分每周測(cè)定，血清生化指標(biāo)和瘤胃發(fā)酵參數(shù)在正試期前1天和試驗(yàn)第8周進(jìn)行測(cè)定。乳中AFM1采用HPLC-MS/MS進(jìn)行分析。應(yīng)用SAS程序的MIXED模型對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。添加AFB1或SM不影響干物質(zhì)采食量(

12、23.9±0.34 kg/d)、產(chǎn)奶量(35.5±0.76 kg/d)、乳蛋白(2.92±0.056％)、乳脂肪(3.64±0.108％)和線性體細(xì)胞(5.1±0.39)等泌乳性能。在含AFB1的日糧中添加SM能顯著降低乳中AFM1濃度(0.191 vs.0.134μg/L，P＜0.01)和AFB1轉(zhuǎn)化為乳AFM1的比率(1.38vs.0.89％，)。給奶牛飼喂AFB1污染飼料會(huì)降低過(guò)氧化物岐化酶、總抗氧化能力、谷胱甘肽過(guò)氧化酶活性、I

13、gG和IgA含量(P＜0.05)，而增加丙二醛濃度(P＜0.05)。日糧中添加SM能夠增加血漿過(guò)氧化物岐化酶活性、總抗氧化能力和IgG的含量，而減少丙二醛含量(P＜0.05)。AFB1和SM均不影響血漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶活力和IgM濃度(P＞0.05)。AFB1僅降低CMCase活性而不影響其它發(fā)酵參數(shù)。然而，添加SM可以增加NH3-N、MCP和VFA含量和CMCase活性、降低pH值，但并不影響VFA組成以及木糖酶和淀

14、粉活性。本試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中AFB1分泌到泌乳早、中期奶牛乳中的比率高于后期;AFB1或SM均不影響奶產(chǎn)量和乳成分，但添加SM可降低乳中AFM1濃度，減緩長(zhǎng)期攝入AFB1給奶牛健康帶來(lái)的不利影響。
　　綜上所述，牧場(chǎng)乳品安全需要考慮牛奶和飼料AFs污染的季節(jié)性差異;泌乳早中期和后期奶牛將日糧AFB1轉(zhuǎn)化乳AFM1的比率分別為0.89％-1.38％和0.46％-0.59％;本試驗(yàn)條件下，SM或AFB1均不影響泌乳奶牛的產(chǎn)奶量和乳成